將細胞凍存管由液態(tài)氮中取出，***稀釋液公司，置于室溫回溫，不用水浴溶解。此時可準備新鮮培養(yǎng) 基、無菌15ml離心管、培養(yǎng)瓶。在生物安全柜內(nèi)，直接以少量培養(yǎng)基反復沖融，使細胞團塊化凍。 先在無菌15ml離心管中加入5ml培養(yǎng)基，再將化凍的細胞懸液加入離心管中。以200~300g，3分鐘離心收集細胞。 倒去上清液，重懸細胞，移到培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。

CFSE是一種可穿透細胞膜的熒光染料，具有細胞膜通透性，能夠自由進入細胞；當CFSE擴散穿過細胞膜，會與細胞內(nèi)源酯酶產(chǎn)生水解反應而被激發(fā)，發(fā)出綠色熒光，這些帶熒光的CFSE會進一步與細胞骨架蛋白結合，形成穩(wěn)定的胞內(nèi)熒光蛋白。每當細胞進行分裂增殖，福州***稀釋液，胞內(nèi)熒光蛋白會被平均分配到下一代細胞中，***稀釋液出售，因此細胞熒光強度會隨著增殖代數(shù)增加而不斷地降低，可用流式細胞儀進一步偵測分析得出細胞分裂增殖的情況。CFSE的濃度，***稀釋液批發(fā)，對于終判斷細胞增殖結果有直接性的影響！

細胞老化的表現(xiàn)：細胞折光性變差，鏡下可見細胞“變薄”，做轉(zhuǎn)染實驗時，細胞死率會較高。但培養(yǎng)液不會發(fā)生迅速變黃的現(xiàn)象，仍清亮。（但如果是***污染的話，一般會出現(xiàn)培養(yǎng)液的迅速變黃，混濁，鏡下可見大量繁殖的***；若是支原體污染的話，細胞也會失去正常形態(tài)，會有細胞的死）。細胞的貼壁性減弱，開始有細胞漂浮于培養(yǎng)液中。