自噬是一個(gè)吞噬自身細(xì)胞質(zhì)蛋白或細(xì)胞器并使其包被進(jìn)入囊泡,并與溶酶體融合形成自噬溶酶體,降解其所包裹的內(nèi)容物的過(guò)程,借此實(shí)現(xiàn)細(xì)胞本身的代謝需要和某些細(xì)胞器的更新。自噬體,其直徑一般為 300 ~ 900 nm,平均 500 nm,囊泡內(nèi)常見(jiàn)的包含物有胞質(zhì)成分和某些細(xì)胞器如線粒體、內(nèi)吞體、過(guò)氧化物酶體等。與其他細(xì)胞器相比,胞外囊泡電鏡服務(wù),自噬體的半衰期很短,只有 8 min 左右,說(shuō)明自噬是細(xì)胞對(duì)于環(huán)境變化的有效反應(yīng)。
據(jù)國(guó)際細(xì)胞外囊泡學(xué)會(huì)(ISEV)在2014年的提議,外泌體鑒定3個(gè)標(biāo)志:透射電鏡(tran***ission electron microscope,TEM)、粒徑(Nanoparticle Tracking Analysis, NTA)、蛋白標(biāo)志物(Western Blot, WB)。
外泌體透射電鏡TEM鑒定外泌體大小、形態(tài),判斷樣本是否含有外泌體。
外泌體透射電鏡分辨率為0.1~0.2nm,適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察,可觀測(cè)樣本中是否存在外泌體樣結(jié)構(gòu)(通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形),同時(shí)可測(cè)量外泌體大小。
檢測(cè)平臺(tái):TecnaiTM G2 Spirit BioTWIN
檢測(cè)結(jié)果:三張透射電鏡圖片,盡可能體現(xiàn)完整的外泌體形態(tài)(如有)
檢測(cè)周期:10-15個(gè)工作日
外泌體miRNA的主要優(yōu)勢(shì):
1.外泌體是由活1細(xì)胞分泌的,代表了活1細(xì)胞內(nèi)部的狀態(tài)與通信信息輸出,因此是較好的診斷***的生物標(biāo)志物的載體;
2.miRNA裝入外泌體或微囊泡中,有包膜包被,可保護(hù)不被降解,穩(wěn)定存在于體液中;
3.外泌體在大部分體液中均存在,可反應(yīng)***的正常生理和病理狀態(tài)。
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