除了用NTA方法，外泌體電鏡技術(shù)服務(wù)，該團(tuán)隊(duì)另基于acetylcholinesterase（一種已知的外泌體表達(dá)蛋白）評(píng)估三種***盒提取外泌體的得率。從NTA結(jié)果看，對(duì)于血1清和血漿樣本，Exo-spin的提取量高，是其他兩種***盒的1-3倍；相對(duì)來(lái)說(shuō)，腦脊髓液的提取率都比較低，外泌體電鏡檢測(cè)服務(wù)，ExoQuick?提取得到的外泌體濃度低。從基于acetylcholinesterase的分析結(jié)果看，其數(shù)值高于NTA方法，且Exo-spin得到的外泌體濃度高于其他兩種***盒。

   外泌體(Exosome)指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的膜性囊泡，其直徑在30-150nm左右。存在于所有生物體液中，包括血液、唾液、尿液、滑液、羊水、細(xì)胞培養(yǎng)液等。不論是正常細(xì)胞還是腫1瘤細(xì)胞，都能夠產(chǎn)生外泌體。　　外泌體富含膽固醇和鞘磷脂，具有脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)；此外，外泌體還含有蛋白質(zhì)和核酸。不同細(xì)胞來(lái)源的外泌體中所含有的生物分子具有細(xì)胞種屬特異性，其外泌體特異性與來(lái)源細(xì)胞相符合。

外泌體分離提取方案。主要方案包括：

1、差速超1速離心法；

適用于細(xì)胞上清、灌洗液、尿液等大體積的樣品；

2、基于PEG沉淀原理的***盒法；

適用于血1清、腦脊液等小體積的樣品；

3、超濾提取法；

適用于***培養(yǎng)液或外泌體含量較低的樣品濃縮。亦可搭配超1速離心法，外泌體電鏡檢測(cè)，做進(jìn)一步的提取。

外泌體是細(xì)胞外囊泡的一種，外泌體電鏡，其膜來(lái)源與粒徑范圍與細(xì)胞外囊泡相似，電鏡下，顯示出典型的茶托狀超微結(jié)構(gòu)。實(shí)際操作中，通過(guò)常規(guī)的單一的方法很難鑒定外泌體。鑒定外泌體需要包含形態(tài)、粒徑、表面分子標(biāo)記物等多方面的鑒定。具體方法包括：透射電鏡（形態(tài)鑒定）、NTA檢測(cè)（粒徑及濃度鑒定）、WB（分子標(biāo)志物）。NTA檢測(cè)作為外泌體鑒定的經(jīng)典方法之一，可同時(shí)反映出檢測(cè)樣品的濃度及粒徑。質(zhì)量較好，純度較高的外泌體樣品，粒徑分布在30-150nm，原液濃度在10^9左右。為了保證檢測(cè)質(zhì)量，對(duì)每一個(gè)樣品，都會(huì)進(jìn)行3次技術(shù)重復(fù)。檢測(cè)周期為2-3個(gè)工作日，可當(dāng)天到樣當(dāng)天出結(jié)果。

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