水稻種子是人類重要的食物來(lái)源，其發(fā)育涉及一個(gè)復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，其中轉(zhuǎn)錄因子發(fā)揮了關(guān)鍵作用。MADS轉(zhuǎn)錄因子家族成員是植物花器1官發(fā)育的重要調(diào)控因子，已有的研究表明，幾乎所有的水稻MADS***都在種子中表達(dá)，但對(duì)MADS家族成員參與水稻種子發(fā)育調(diào)控的研究結(jié)果仍比較少。
在這項(xiàng)研究中，研究組基于前期的表達(dá)譜研究基礎(chǔ)，分析得到了一個(gè)在水稻生殖發(fā)育階段優(yōu)先表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子MADS29。細(xì)致分析表明，MADS29在花藥、胚珠和種子中均表達(dá)，且在受精后的母體***表達(dá)量高。MADS29的反義轉(zhuǎn)1***植株呈現(xiàn)種子皺縮、淀粉粒形態(tài)異常、灌漿速率下降等表型。通過(guò)解剖學(xué)切片、末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記實(shí)驗(yàn)和全***組表達(dá)譜芯片分析等，研究人員證明了MADS29通過(guò)調(diào)控程序化死1亡(PCD)過(guò)程促進(jìn)珠心細(xì)胞和珠心突起處的降解。進(jìn)一步的體外凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)顯示，MADS29能夠通過(guò)直接結(jié)合程序化死1亡相關(guān)***的啟動(dòng)子區(qū)域而調(diào)控其表達(dá)，進(jìn)而影響胚乳發(fā)育。
原位雜交雜交液注意事項(xiàng)：
（1）雜交液內(nèi)除含一定濃度的標(biāo)記探針外，還含有較高濃度的鹽類、甲酰胺、***葡聚糖、牛血1清白蛋白及載體DNA或RNA等。
（2）雜交液中含有較高濃度的Na+可使雜交率增加，可以減低探針與***標(biāo)本之間的靜電結(jié)合。甲酰胺可使Tm降低，雜交液中含每1%的甲酰胺可分別使RNA：RNA，RNA：DNA，分子病理技術(shù)服務(wù)，DNA：DNA的雜交溫度降低0.35℃，0.5℃和0.65℃。，所以雜交液中加入適量的甲酰胺，可避免因雜交溫度過(guò)高而引起的***形態(tài)結(jié)構(gòu)的***以及標(biāo)本的脫落。***葡聚糖能與水結(jié)合，從而減少雜交液的有效容積，提高探針有效濃度，以達(dá)到提高雜交率的目的（尤其對(duì)雙鏈核酸探針）。
在雜交液中加入牛血1清白蛋白及載體DNA或RNA等，都是為了阻斷探針與***結(jié)構(gòu)成分之間的非特異性結(jié)合，以減低背景。
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