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原理
原位雜交技術(shù)是在一定的溫度和離子濃度下,使具有特異序列的單鏈探針通過(guò)堿基互補(bǔ)規(guī)則與***細(xì)胞內(nèi)待測(cè)的核酸復(fù)性結(jié)合而使得***細(xì)胞中的特異性核酸得到***,并通過(guò)探針上所標(biāo)記的檢測(cè)系統(tǒng)將其在核酸的原有位置上顯示出來(lái)。
經(jīng)特定標(biāo)記的核苷酸鏈為探針,可與***切片、細(xì)胞或染色體標(biāo)本中的待檢DNA片段或mRNA進(jìn)行雜交,然后顯示標(biāo)記物,從而分析待檢核酸的分布和含量。利用此項(xiàng)技術(shù)可研究各種***在染色體上的***,編碼某種蛋白質(zhì)的mRNA在胞質(zhì)中的表達(dá)。
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原位雜交(in situ hybridization)將標(biāo)記的核酸探針與細(xì)胞或***中的核酸進(jìn)行雜交,稱為原位雜交,使用DNA或者RNA探針來(lái)檢測(cè)與其互補(bǔ)的另一條鏈在***或其他真核細(xì)胞中的位置。
原位雜交技術(shù)的基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補(bǔ)的堿基序列,將有放1射性或非放1射性的外源核酸(即探針)與***、細(xì)胞或染色體上待測(cè)DNA或RNA互補(bǔ)配對(duì),結(jié)合成專一的核酸雜交分子,分子病理技術(shù)服務(wù),經(jīng)一定的檢測(cè)手段將待測(cè)核酸在***、細(xì)胞或染色體上的位置顯示出來(lái)。為顯示特定的核酸序列必須具備3個(gè)重要條件:***、細(xì)胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補(bǔ)的核苷酸序列(即探針)、有與探針結(jié)合的標(biāo)記物
分子病理檢測(cè)的意義:
通過(guò)分子檢測(cè)協(xié)助病理診斷
某些腫1瘤具有特定的分子病理學(xué)改變,對(duì)于病理常規(guī)染色難于診斷的這些腫1瘤,進(jìn)行分子病理檢測(cè)可協(xié)助得出準(zhǔn)確的病理診斷。例如淋巴1瘤的鑒別診斷往往依賴于形態(tài)和免1疫組化的綜合判斷,但有些時(shí)候,這些手段也不能滿足診斷的需要,這時(shí)我們通過(guò)IG或TCR***重排檢測(cè),可協(xié)助鑒別淋巴細(xì)胞的普通增殖和腫1瘤性增殖。
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