外泌體分離提取方案。主要方案包括：

1、差速超1速離心法；

適用于細胞上清、灌洗液、尿液等大體積的樣品；

2、基于PEG沉淀原理的***盒法；

適用于血1清、腦脊液等小體積的樣品；

3、超濾提取法；

適用于***培養(yǎng)液或外泌體含量較低的樣品濃縮。亦可搭配超1速離心法，外泌體測序測試服務(wù)，做進一步的提取。

外泌體是細胞外囊泡的一種，其膜來源與粒徑范圍與細胞外囊泡相似，電鏡下，顯示出典型的茶托狀超微結(jié)構(gòu)。實際操作中，通過常規(guī)的單一的方法很難鑒定外泌體。鑒定外泌體需要包含形態(tài)、粒徑、表面分子標記物等多方面的鑒定。具體方法包括：透射電鏡（形態(tài)鑒定）、NTA檢測（粒徑及濃度鑒定）、WB（分子標志物）。NTA檢測作為外泌體鑒定的經(jīng)典方法之一，可同時反映出檢測樣品的濃度及粒徑。質(zhì)量較好，純度較高的外泌體樣品，粒徑分布在30-150nm，原液濃度在10^9左右。為了保證檢測質(zhì)量，對每一個樣品，都會進行3次技術(shù)重復。檢測周期為2-3個工作日，可當天到樣當天出結(jié)果。

自噬（autophagy）是由 Ashford 和 Porter 在 1962 年發(fā)現(xiàn)細胞內(nèi)有“自己吃自己”的現(xiàn)象后提出的，是指從粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的無核糖體附著區(qū)脫落的雙層膜包裹部分胞質(zhì)和細胞內(nèi)需降解的細胞器、蛋白質(zhì)等成分形成自噬體（autophagosome），并與溶酶體融合形成自噬溶酶體，降解其所包裹的內(nèi)容物，以實現(xiàn)細胞本身的代謝需要和某些細胞器的更新。

外泌體裝載著各種免1疫相關(guān)分子，通過這些分子來調(diào)節(jié)免1疫應答。例如，在細胞殺傷性T細胞或者自然殺傷性細胞來源的外泌體上，攜帶Fas配體、TRAIL、CD40配體等TNF家族蛋白，可誘導靶1細胞凋亡。

有報道稱，***細胞中也可以釋放裝載著Fas配體或TRAIL等的外泌體，誘導免1疫細胞凋亡，使***細胞免受免1疫細胞的攻擊。一般情況下，TNF家族蛋白以膜結(jié)合形式產(chǎn)生，被膜型金屬蛋白酶切割后轉(zhuǎn)變?yōu)榭扇苄缘鞍?。膜結(jié)合蛋白主要擔負誘導細胞凋亡的功能，但可溶性蛋白的活性較弱。

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