脂肪酸具有長(zhǎng)碳?xì)滏満鸵粋€(gè)羧基末端的有機(jī)化合物的總稱,和甘油結(jié)合生成脂肪,故名;是動(dòng)物、植物和微生物脂質(zhì)的基本組成成分。在生物***和細(xì)胞中游離形式的脂肪酸僅存痕量。從各種生物體中已分離出100多種脂肪酸。
目前檢測(cè)脂肪酸的手段主要包括紅外吸收光譜法、毛細(xì)管電泳法、氣相色譜法、陰離子色譜法、Elisa法和氣質(zhì)聯(lián)用法。其中氣相色譜(GC-FID)和氣質(zhì)聯(lián)用發(fā)(GC-MS)測(cè)定反式脂肪酸具有寬的檢測(cè)范圍和較高的靈敏度,是較為準(zhǔn)確、可靠的分析方法。
華士特生物采用GC-MS建立37種長(zhǎng)鏈脂肪酸,8種短鏈脂肪酸的定量檢測(cè)方法。歡迎咨詢送檢。
華士特脂肪酸定量 檢測(cè)方法:
1、樣品提取
稱取適量樣品,加入4mL的1醇/CH2Cl2(1:3)混合溶液,搖勻;恒溫在30℃以下超聲抽提10min。取出離心管,放于離心機(jī)中離心(1800rpm,10min),收集上清液,重復(fù)3次;將萃取液在柔和氮?dú)饬飨麓蹈伞?
2、萃取液的皂化
加入3mL 6%KOH的1醇溶液(配制:6gKOH/1醇118mL左右),超聲10min,放置30min,重復(fù)3次,室溫放置過(guò)夜(瓶蓋蓋緊)進(jìn)行堿水解;加入2mL正己烷,超聲10min,搖勻,震蕩離心,棄除上層正己烷萃取液,重復(fù)3次。在上述萃取完剩下的溶液中(水相),加入約1mL 4N的HCl使pHlt;2,再用2mL正己烷萃取3次。
3、脂肪酸的衍生化
將上述萃取液,轉(zhuǎn)移到帶蓋玻璃管中,用氮?dú)獯蹈珊螅尤爰s2mL BF3-MeOH,玻璃管上空間沖入氮?dú)夂笊w蓋密閉,于90℃下加熱2h;待樣品冷卻后,加入5%N***溶液約1ml,用2ml正己烷萃取3次,并將萃取液轉(zhuǎn)移到2mL進(jìn)樣瓶中,氮?dú)獯蹈?,待分析?
4、色譜條件
色譜柱:Thermo TG-5MS 30m x 0.25mm x 0.25?m
升溫程序:80度起始溫度,保持1分鐘;10度/min升溫到200度,5度/min升溫到225度,2度/min升溫到250度,保持5min。
MS,EI源。
華士特生物專注于生命科學(xué)研發(fā)與技術(shù)服務(wù)領(lǐng)域,擁有“分離純化平臺(tái)”、“分析檢測(cè)平臺(tái)”、“組學(xué)測(cè)試分析”等技術(shù)服務(wù)平臺(tái)。公司設(shè)備平臺(tái)包括液相色譜、離子色譜、凝膠色譜、毛細(xì)管電泳、GC-MS、HPLC-MS、DSC、TGA等多種高精密實(shí)驗(yàn)儀器。公司還享有武漢生物技術(shù)研究院公共技術(shù)服務(wù)平臺(tái),是華中地區(qū)設(shè)備***、功能齊全的生物實(shí)驗(yàn)儀器共享平臺(tái)。***的數(shù)據(jù)庫(kù):擁有多個(gè)商業(yè)數(shù)據(jù)庫(kù),同時(shí)建立了超過(guò)百個(gè)標(biāo)準(zhǔn)晶數(shù)據(jù)庫(kù),使定性更加準(zhǔn)確。
華士特生物提供DHA、ARA、AA等長(zhǎng)鏈脂肪酸及其他短鏈脂肪酸檢測(cè),可檢測(cè)脂肪酸37種。海洋魚類是提取DHA的主要來(lái)源。海產(chǎn)魚類特別是中上層魚類的油脂中含有大量的DHA,如鮪魚、秋刀魚、遠(yuǎn)東沙丁魚的油中DHA的含量均在10%以上。目前全世界魚類油脂的年產(chǎn)量在100萬(wàn)噸左右,理論上從中可提取10~25萬(wàn)噸。實(shí)際上由于分離技術(shù)等因素的限制,魚的油脂產(chǎn)量要低于上述數(shù)字、而且提取的魚類油脂有相當(dāng)大的部分被氧化和滲入人造黃油或起酥油中被消耗掉,真正可用于分離DHA的僅占少部分。除此之外還有貝類和甲殼類。