武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、***、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。1)將探針回收,放于-20C保存(通常探針可重復(fù)使用十次左右)。
原位雜交:在研究DNA分子原理的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種技術(shù)。尤其在***分析和診斷方面能作定性、***和定量分析,已成為的分子病理學(xué)技術(shù),同時(shí)在分析低豐度和罕見的mRNA表達(dá)方面已展示了分子生物學(xué)的一重要方向。其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段,在適宜的條件下,能過氫鍵結(jié)合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點(diǎn),應(yīng)用帶有標(biāo)記的(有性同位素,如3H、35S、32P、熒光素生物素、等非性物質(zhì))DNA或RNA片段作為核酸探針,與***切片或細(xì)胞內(nèi)待測(cè)核酸(RNA或DNA)片段進(jìn)行雜交,然后可用自顯影等方法予以顯示,在光鏡或電鏡下觀察目的 mRNA或DNA 的存在并***;
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、***、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。mFISH能同時(shí)檢測(cè)多個(gè)***,分辨復(fù)雜的染色體易位和微小缺失,區(qū)分間期細(xì)胞多倍體和超二倍體等。
原位雜交天1. 重新水化和固定1) 吸取固定好的胚胎,加入50%的PBST溶液,放置5分鐘。與病理學(xué)檢查結(jié)果比較,FISH檢測(cè)的特異性為100%,敏***為87%。2) 置換成30%的PBST溶液,放置5分鐘3) 置換成PBST溶液,放置5分鐘,重復(fù)一次4) 置換成4%多聚甲醛的PBS溶液固定20分鐘5) 用PBST洗兩次,每次放置五分鐘,室溫。用10ul/ml的蛋白酶K在室溫下處理胚胎。5體節(jié)以下的胚胎不處理,5體節(jié)到24小時(shí)的胚胎處理3分鐘,24小時(shí)以上的胚胎處理5分鐘或者更長(zhǎng)。發(fā)育時(shí)間越短的胚胎越嫩,可以不用或者少用蛋白酶處理,發(fā)育時(shí)間長(zhǎng)的胚胎就需要用蛋白酶來(lái)疏松***,以便于雜交。
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、***、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。方法應(yīng)用FISH技術(shù)分析110例血尿患者尿脫落細(xì)胞染色體異常情況,其中包括86例、泌尿系12例、濾泡(腺性)4例、良性(狀瘤)4例、不明原因血尿4例。
與其他原位雜交技術(shù)相比,熒光原位雜交具有很多優(yōu)點(diǎn),主要體現(xiàn)在:①FISH不需要性同位素標(biāo)記,更經(jīng)濟(jì)安全。這些固定液都有不同的優(yōu)缺點(diǎn)因此要根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)對(duì)象,選擇的固定液。②FISH的實(shí)驗(yàn)周期短,探針穩(wěn)定性高,特異性好,***準(zhǔn)確,能迅速得到結(jié)果。③FISH通過多次化學(xué)反應(yīng),使雜交信號(hào)增強(qiáng),靈敏度提高,其靈敏度與性探針相當(dāng)。④多色FISH通過在同一個(gè)核中顯示不同的顏色可同時(shí)檢測(cè)多種序列。⑤既可以在玻片上顯示中期染色體數(shù)量或結(jié)構(gòu)的變化。也可以在懸液中顯示間期染色體DNA的結(jié)構(gòu)。 [1]