1.簡(jiǎn)易芯片
制作簡(jiǎn)易芯片時(shí),為什么替代肖特玻片,使用機(jī)械臂把大量已知或未知序列的DNA片段點(diǎn)在--張很小的玻璃片(通常為2cmX2cm)或尼龍膜上,替代肖特玻片公司,再經(jīng)過物理吸附作用達(dá)到固定化(cDNA 芯片)。也可以直接在玻璃板表面進(jìn)行化學(xué)合成,從而得到寡聚核苷酸芯片。將芯片與待研究的eDNA或其他樣品雜交,經(jīng)過計(jì)算機(jī)掃描和數(shù)據(jù)處理,便可以觀察到大規(guī)模的***群在不同***、同一***不同發(fā)育時(shí)期或不同生理?xiàng)l件下的表達(dá)***調(diào)控情況。簡(jiǎn)易芯片一般的***數(shù)量少(一般不超過2000),浙江替代肖特玻片,主要用于研究小部分特定***的表達(dá)狀態(tài)。簡(jiǎn)易芯片一般可以用于手工制作或者機(jī)械手點(diǎn)樣。
為了保證***芯片數(shù)據(jù)的可靠性,芯片中還需加.上多個(gè)持家***(housekeeping genes)作為內(nèi)對(duì)照。持家***,如呼吸作用的酶類和細(xì)胞骨架蛋白***等,是維持細(xì)胞正常生長(zhǎng)發(fā)育的必須***,其表達(dá)水平在細(xì)胞內(nèi)基本不變。處理數(shù)據(jù)時(shí),認(rèn)為持家***的反應(yīng)信號(hào)在兩種***中不變,什么是替代肖特玻片,依此確定其他***表達(dá)信號(hào)的相對(duì)值。
***芯片(genechip)(又稱DNA芯片、生物芯片)的原型是80年代中期提出的。***芯片的測(cè)序原理是雜交測(cè)序方法,即通過與一組已知序列的核酸探針雜交進(jìn)行核酸序列測(cè)定的方法,在一塊基片表面固定了序列已知的靶核苷酸的探針。當(dāng)溶液中帶有熒光標(biāo)記的核酸序列TATGCAATCTAG,與***芯片上對(duì)應(yīng)位置的核酸探針產(chǎn)生互補(bǔ)匹配時(shí),通過確定熒光強(qiáng)度強(qiáng)的探針位置,獲得一組序列完全互補(bǔ)的探針序列。據(jù)此可重組出靶核酸的序列。
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