目前已有多種方法可以將寡核苷酸或短肽固定到固相支持物上。這些方法總體上有兩種,即原位合成( in situ synthesis )與合成點樣兩種。支持物有多種如玻璃片、硅片、聚膜、纖維素膜、尼龍膜等,但需經(jīng)特殊處理。作原位合成的支持物在聚合反應(yīng)前要先使其表面衍生出羥基或氨基(視所要固定***芯片的分子為核酸或寡肽而定)并與保護基建立共價連接;作點樣用的支持物為使其表面帶上正電荷以吸附帶負電荷的探針分子,什么是epoxysilane,通常需包被以氨基***或多聚賴氨酸等。
新興的微陣列芯片技術(shù)是分子生物學(xué)技術(shù)和計算機技術(shù)高度有機結(jié)合的產(chǎn)物,體積小、實驗效能高 , 可以節(jié)約人力、 物力和時間, 是對傳統(tǒng)分子生物學(xué)研究方法和臨床檢測方法的重要補充 。在微陣列技術(shù)的實際應(yīng)應(yīng)用中 ,epoxysilane是什么,數(shù)據(jù)分析具有舉足輕重的作用 , 目前還沒有對現(xiàn)有的各種統(tǒng)計學(xué)模型進行過綜合評價 。這一缺陷亟待彌補 。雖然人類***組草圖已經(jīng)繪制完成 , 但整個***組研究才剛剛開始 。此時如果沒有把研究所產(chǎn)生的海量數(shù)據(jù)進行有效的管理 , 將對后續(xù)研究的深入和應(yīng)用造成嚴重的影響 。從現(xiàn)有資料來看, 應(yīng)用微陣列芯片技術(shù)所產(chǎn)生的數(shù)據(jù)還沒有統(tǒng)一的管理方案, 這些研究的結(jié)果仍然分散地保存在不同的數(shù)據(jù) 庫中,這些數(shù)據(jù)庫也處在探索階段 。
因此,一般的建議步驟是活化羧基使用pH=5-6的MES緩沖液,epoxysilane,之后使用PBS緩沖液調(diào)節(jié)pH=7.2-7.5完成后的偶聯(lián)反應(yīng)。
與EDC/NHS類似的是,也可以使用將兩個含有氨基的分子連接到一起。比如,先在納米粒子外包一層二氧化硅,通過APTES等***引入氨基,之后通過將氨基修飾的納米晶和蛋白質(zhì)的氨基偶聯(lián)到一起。
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