蛋白質(zhì)晶體板制作

設(shè)計并制作了一種在微腔中對蛋白質(zhì)進行微批量法(microbatch)結(jié)晶的碟式微流控結(jié)晶芯片，它是一種高通量、低成本、低耗樣量(納升級)、操作簡便的蛋白質(zhì)結(jié)晶篩選方法，這種芯片能成功地結(jié)晶溶菌酶(lysozyme)和青色熒光蛋白(CyPet).為了系統(tǒng)地比較這種微流控芯片與傳統(tǒng)的使用蒸汽擴散法的24孔結(jié)晶板的結(jié)晶能力，48孔晶體板報價，用3個Hampton結(jié)晶***盒，在4℃及20℃培養(yǎng)條件下分別對5種標準蛋白(溶菌酶(lysozyme)、木聚糖酶(xylanase)、脂肪酶B(lipase B)、葡萄糖異構(gòu)酶(glucose isomerase)和嗜熱菌蛋白酶(thermolysin))進行了結(jié)晶篩選實驗.結(jié)果表明，在4℃時微流控芯片與24孔結(jié)晶板有相近數(shù)目的結(jié)晶條件(91 vs 98)。

蛋白結(jié)晶板使用

蛋白質(zhì)是水產(chǎn)品的主要組分，其含量測定在水產(chǎn)品加工及研究等方面應(yīng)用極為廣泛.目前，48孔晶體板，各蛋白含量快速測定方法通常是在試管中進行反應(yīng)并應(yīng)用分光光度計測定，其操作過程較繁瑣，48孔晶體板哪家好，分析大批量樣品時效率低，上述缺點在高通量篩選、檢測等場合尤為突出.為了克服該不足，實現(xiàn)蛋白含量的快速高通量測定，本研究基于Folin-酚法，利用96孔板作為反應(yīng)器并配合比色，建立了一種蛋白含量測定的微孔板方法并評價其合理性.該法測得樣品的蛋白含量與常規(guī)法結(jié)果無顯著性差異，反應(yīng)在30-90 min顯色穩(wěn)定，標準曲線的線性相關(guān)系數(shù)R2=0.9922，標準偏差范圍為0.07%-0.78%，檢測限為10 μg.與常規(guī)法相比，微孔板法保持了Folin-酚法的準確性及穩(wěn)定性，同時具有通量高、節(jié)省樣品、***及測定時間等優(yōu)點，在蛋白高通量快速測定方面更具優(yōu)勢。

蛋白結(jié)晶板

盡管近些年來在蛋白質(zhì)結(jié)晶的理論、方法和技術(shù)上已取得巨大發(fā)展，獲得衍射良好的蛋白質(zhì)晶體仍然是利用X-射線解析蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的一個主要瓶頸問題。這里我們發(fā)展了一種新型的蛋白質(zhì)結(jié)晶方法—固液界面方法，48孔晶體板公司，即SLIM。該方法主要包括兩個部分1)預(yù)先加入并干燥蛋白質(zhì)母液;2)進行晶體生長的時候，直接將蛋白質(zhì)溶液加入"干母液"中，從而產(chǎn)生一個固體(干母液)和液體(蛋白質(zhì)溶液)的界面。該方法不僅操作簡單、快速，而且降低了對蛋白質(zhì)溶液濃度的要求。

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