兔單胺氧化酶A(MAOA) ELISA ***盒
ELISA的樣本實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的樣本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆谩?duì)于隔天再檢測(cè)的樣本,及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的,***好-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。
液體類標(biāo)本: 包括***、血漿、尿液、胸***、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1. ***:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3. 尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸***、腦脊液參照此實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
5. 培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入***蛋白萃取***,以使細(xì)胞***并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6. ***標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或***蛋白萃取***, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。 篤瑪代測(cè)服務(wù):
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容: 1、雙***夾心法檢測(cè)抗原 2、間接法檢測(cè)*** 3、為客戶提供各種ELISA技術(shù)進(jìn)行樣本檢測(cè)。
寄標(biāo)本時(shí)需注明以下情況:1、標(biāo)本編號(hào);2、所測(cè)項(xiàng)目;3、是否做復(fù)孔;4、聯(lián)系方式;5、實(shí)驗(yàn)后標(biāo)本是否寄回。
兔單胺氧化酶A(MAOA) ELISA ***盒
樣品測(cè)定
1. 移取xx微升 去干擾液(Reagent C)到上述待測(cè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)樣品管里,混勻
2. 加入xx微升 反應(yīng)液(Reagent D)
3. 加入xx微升 顯色液(Reagent E),混勻
4. 室溫下孵育20分鐘
5. 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心3分鐘,速度為5000g
6. 移取1毫升上清液到比色皿
7. 即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè),獲得待測(cè)樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品讀數(shù)
兔單胺氧化酶A(MAOA) ELISA ***盒
ELISA***盒常見問題解析:
1.加樣量不一致?
解決方法:樣品稀釋前應(yīng)充分混勻,盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴。
2.樣品數(shù)量多少不一,加樣時(shí)間有長有短?
解決方法:重復(fù)某一樣品時(shí),加樣時(shí)間盡可能與***次接近。
3.保溫時(shí)間不一致,洗滌條件不一致,操作人員不一致?
解決方法:重復(fù)測(cè)定標(biāo)本,操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性。