武漢默沙克生物????科技有限公司是一家專門從事生物制劑研發(fā)與生產(chǎn)的企業(yè)。目前可提供各種抗1體、***學(xué)***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物學(xué)***等多用途多屬種的高品質(zhì)產(chǎn)品,服務(wù)涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、***學(xué)等生命科學(xué)領(lǐng)域。
計算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。這種固相酶***測定方法在1971年***1初建立時稱為酶聯(lián)***吸附劑測定(enzymelinkedimmunosorbentassay),簡稱ELISA,在國內(nèi)有譯作酶聯(lián)***吸附試驗(yàn)的,雖然含義不完全確切,但已習(xí)用。
1.取材
切取的***塊不宜太大,以利于固定劑穿透,通常以6mm×6mm×5mm為宜。
注意事項(xiàng):
(1)取材動作要迅速,不宜作太久的拖延以免***細(xì)胞的成分、結(jié)構(gòu)等發(fā)生變化。
(2)切片材料應(yīng)根據(jù)需要觀察的部位進(jìn)行選,盡可能不要損傷所需要的部分。
2.固定
將切好的***用生理鹽水***洗3次,立即投入10%中性1福爾1馬林固定液或4%多聚甲醛中固定,固定36小時。
(1)一般固定液,都以新配為好,配好后應(yīng)貯存在陰涼處,不宜放在日光下,以免引起化學(xué)變化,失去固定作用。
(6)脫水必須徹底,否則不易透明,甚至使透明劑內(nèi)出現(xiàn)白色混濁現(xiàn)象
5.透明(環(huán)保透明脫蠟液)武漢默沙克
純酒精、二甲本等量混合液15min,二甲本Ⅰ60min、Ⅱ30min(至透明為止)。
由于乙醇與石蠟不相溶,而二甲本既能溶于乙醇又能溶于石蠟,所以脫水后還要經(jīng)過二甲本以過渡。當(dāng)***中全部被二甲本占有時,光線可以透過,***呈現(xiàn)出不同程度的透明狀態(tài)。
透明注意事項(xiàng)
(1)使用透明劑時,要隨時蓋緊蓋子,以免空氣中的水分進(jìn)入。
(2)更換每級透明劑,動作要迅速,一方面為了不使材料塊干涸,另一方面能避免吸收濕氣。
(3)在透明過程中, 如果材料周圍出現(xiàn)白色霧狀,說明材料中的水未被脫凈,應(yīng)退回純酒精中重新脫水,然后再透明。
17.脫水Ⅱ
將切片放入95%乙醇中洗去多余的紅色,然后放入無水乙醇中3-5min。后用吸水紙吸干多余的乙醇。
18.透明
切片放入二甲本Ⅰ、Ⅱ中各5min。
二甲本應(yīng)盡量保持無水,應(yīng)經(jīng)常更換,或用紗布包無水硫1酸銅放入染色缸內(nèi)吸收水分。切片如在二甲本中出現(xiàn)白霧現(xiàn)象,說明脫水未盡,應(yīng)退回乙醇中重新脫水,否則切片難以鏡檢。
19.封藏:中性樹膠封存
因切片經(jīng)二甲本透明,使用中性樹膠作為封藏劑,樹膠可用二甲本稀釋至合適的稠度。