病理實(shí)驗(yàn)外包常見的病理染色實(shí)驗(yàn)是組化染色,用標(biāo)記的特異性對(duì)***切片或細(xì)胞標(biāo)本中某些化學(xué)成分的分布和含量進(jìn)行***和細(xì)胞的定性、***或定量研究,這種技術(shù)稱為***化學(xué)(immunohistochemistry)技術(shù)或細(xì)胞化學(xué)(immunocytochemistry)技術(shù)。根據(jù)抗原反應(yīng)和化學(xué)顯色原理,***切片或細(xì)胞標(biāo)本中的抗原先和一抗結(jié)合,再利用一抗與標(biāo)記生物素、熒光素等的二抗進(jìn)行反應(yīng),通過顯色反應(yīng)或熒光來顯示細(xì)胞或***中化學(xué)成分,在光學(xué)顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原反應(yīng)產(chǎn)物,從而能夠在細(xì)胞爬片或***切片上原位確定某些化學(xué)成分的分布和含量。組化的特點(diǎn)是特異性強(qiáng)、***準(zhǔn)確,因此能夠明確目的蛋白的細(xì)胞***、亞細(xì)胞***及多種蛋白之間的相互位置關(guān)系。組化在***上應(yīng)用廣泛,尤其在臨床診斷和鑒別診斷中具有普遍認(rèn)可的實(shí)用價(jià)值。其應(yīng)用于低分化或未分化的鑒別診斷時(shí),準(zhǔn)確率可達(dá)50% -75%。
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色多聚甲醛保存***的注意事項(xiàng):
多聚甲醛放置過久其中的醛基可能會(huì)被氧化為酸,使溶液pH降低,切片多少錢,從而影響染色。
不同細(xì)胞或***樣品所需的固定時(shí)間有所不同,石蠟切片,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或***的種類以及***塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間。
多聚甲醛雖然作用溫和,但能硬化***,固定時(shí)間過久會(huì)導(dǎo)致***變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過24小時(shí)。
多聚甲醛可長期存在于固定過的細(xì)胞或***樣品中,固定完成后用適當(dāng)?shù)南礈煲夯蛩疀_洗數(shù)小時(shí)仍會(huì)有殘留,因此后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果如果受醛基影響,須盡量洗去殘留的多聚甲醛。
醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,切片,影響組化結(jié)果。因此,4%多聚甲醛固定的細(xì)胞或***樣品在進(jìn)行組化檢測時(shí),有時(shí)需要對(duì)抗原***行修復(fù),然后才能進(jìn)行染色等后續(xù)操作。
病理實(shí)驗(yàn)外包,病理染色HE染色常見問題:Q1:HE染色常見的紅藍(lán)失調(diào)
答:
(1)偏藍(lán)色:素染色過深,分化不夠;伊紅***過期;伊紅染色時(shí)間太短,分化過度。
(2)偏紅色:素染色過淺,分化過度;***固定不佳,細(xì)胞核不著色;脫蠟不,素染不上;素氧化成熟不夠;伊紅染色過深,分化不足。
Q2:HE染色后出現(xiàn)的大白塊或斑點(diǎn)
答:脫蠟前烤片溫度偏低,病理切片能保存多久,時(shí)間過短,蠟未完全融化;切片在脫蠟溶劑中停留時(shí)間過短;脫蠟溶劑使用太久,得更新。
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