層析柱與液相柱的區(qū)別
1、壓力
液相色譜柱(尤其是分析性液相色譜):壓力較高,陰陽樹脂柱廠家,一般為10-20Mpa
層析柱:一般為常壓,或使用真空泵(0.1Mpa左右)
2、填料
液相色譜柱:粒徑較?。ǔR?guī)5-20um)
層析柱:粒徑較大
3、分離度
由第二項決定,粒徑越小,單位長度下理論塔板數(shù)越高
液相色譜柱:分離度比層析柱好
4、效率
液相色譜柱:分離速度快,一般在一小時內(nèi)
層析柱:分離時間長,一小時以上
交換
將試液加到交換柱上,用活塞控制一定的流速進行交換。
洗脫
當交換完畢之后,一般用蒸餾水洗去殘存溶液,然后用適當?shù)南疵撘哼M行洗脫。在洗脫過程中、上層被交換的離子先被洗脫下來,經(jīng)過下層未被交換的樹脂時,又可以再度被交換。
陽離子交換樹脂常采用HCl溶液作為洗脫液;陰離子交換樹脂常采用N***或NaOH溶液作為洗脫液。洗脫之后的樹脂已得到再生,用蒸餾水洗滌干凈即可再次使用。
層析柱的規(guī)格
層析柱的直徑大小不影響分離度,樣品用量大,可加大柱的直徑,一般制備用凝膠柱,直徑大于2厘米,但在加樣時應(yīng)將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。此外, 直徑加大,洗脫液體體積增大,樣品稀釋度大。分離度取決于柱高,大連陰陽樹脂柱,為分離不同組分,凝膠柱床必須有適宜的高度,分離度與柱高的平方根相關(guān),陰陽樹脂柱生產(chǎn)廠家,但由于軟凝膠柱過高擠壓變形阻塞,一般不超過1米。分族分離時用短柱,一般凝膠柱長20-30厘米,柱高與直徑的比較5:1─10:1,凝膠床體積為樣品溶液體積的4-10倍。分級分離時柱高與直徑之線為20:1─100:1,常用凝膠柱有50×25厘米,10×25厘米。層析柱濾板下的死體積應(yīng)盡可能的小,如果支掌濾板下的死體積大,被分離組分之間重新混合的可能性就大,陰陽樹脂柱供應(yīng),其結(jié)果是影響洗脫峰形,出現(xiàn)拖尾出象,降低分辯力。在分離時,死體積不能超過總床體積的1/1000。
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