實驗動物的標(biāo)記
1. 染色法 適用于小動物,如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是將化學(xué)藥品涂在動物的被毛上,以不同顏色來區(qū)分動物。常用的化學(xué)藥品有:3%~5%溶液(黃色)、0.5%中性品紅(紅色)、2%(咖啡色)。
標(biāo)記的原則是:先左后右,從上到下。如果動物編號是二位數(shù)或三位數(shù),那相應(yīng)的用二種或三種不同的顏色,不同顏色代表不同位數(shù)(個位、十位、百位),標(biāo)記的原則同上。
2. 掛牌法 常用于大動物。寫有編號的金屬牌掛在動物的頸上來區(qū)分動物。對于猴、狗、貓等動物有時可不做標(biāo)記,只記錄它們的外表特征和毛色即可。
3. 籠子編號 標(biāo)記在籠子上。
以上只介紹了幾種的方法,在使用中可靈活掌握。
實驗動物各種體液、的采集方法
消化液的采集
(一) 唾液
1. 直接抽取法 在急性實驗中, 可用吸管直接插入動物口腔或唾液腺導(dǎo)管抽吸唾液,此法非常簡單,但從口腔抽吸唾液會有雜質(zhì)混入。
2. 制造腮腺瘺法 在慢性實驗中,收集狗的唾液,要用手術(shù)方法將腮腺導(dǎo)管開口移向體外,即以腮腺導(dǎo)管為中心,切成一直徑約2~3cm的圓形粘膜片,將此粘膜片,與周圍組織分開,天津動物實驗外包,穿過皮膚切口引到頰外,將帶有導(dǎo)管開口的粘膜片與周圍的皮膚縫合,腮腺分泌的唾液就流出頰外。這種方法可以收集到較純凈的唾液。
(二)胃液
1. 直接收集胃液法 急性實驗時,先將動物,將插胃管經(jīng)口插入胃內(nèi),在灌胃管的出口連一,用此可收集到胃液,此法適用于狗等大型動物。如是大鼠,需手術(shù)剖腹,從幽門端向胃內(nèi)插入一塑料管,再由口腔經(jīng)食道將一塑料管插入前胃,用pH7.5、35℃左右的生理鹽水,以12ml/h的流速灌胃,收集流出液,進(jìn)行分析。
2. 制備胃瘺法 在慢性實驗中,收集胃液多用胃瘺法,如全胃瘺法、巴氏小胃瘺法、海氏小胃瘺法等。制備小胃是將動物的胃分離出一小部分,縫合起來形成小胃,主胃與小胃互不相通,主胃進(jìn)行正常消化,從小胃可收集到純凈的胃液。應(yīng)用該法,可以待動物恢復(fù)健康后,在動物清醒狀態(tài)下反復(fù)采集胃液。
(三)胰液和膽汁
在動物實驗中,主要是通過對胰總管和膽總管的插管而獲得胰液或膽汁。狗的胰總管開口于十二指腸降部,在緊靠腸壁處切開胰管,結(jié)扎固定并與導(dǎo)管相連,即可見無色的胰液流入導(dǎo)管。大鼠的胰管與膽管匯集于一個總管,動物實驗課題外包公司,在其入腸處插管固定,并在近肝門處結(jié)扎和另行插管,可分別收集到胰液和膽汁。
有時也可通過制備胰瘺和膽囊瘺來獲得胰液和膽汁。
營養(yǎng)不良性gan硬化動物模型
(1)fu制方法 離乳雄性大鼠,每日喂食缺乏dan堿的低蛋白高脂肪飼料8~10g,連續(xù)2~3個月。該飼料用酪蛋白或大豆作為蛋白來源,另加蔗糖、豬油、維生素粉、鹽和定量的L-胱酸而組成。造模過程中,每日觀察動物的一般活動狀況,每周稱量動物體重,造模結(jié)束后抽取全血制備xue清、稱取部分肝組織制備勻漿作生化檢測,摘取一些qi官稱重,換算成臟器系數(shù),并對肝組織進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)檢查。
(2)模型特點 造模1個月時,約有20%動物si亡,2個月時,動物體重增長停止,小鼠動物實驗全套外包,有fu水潴留、出血、脫毛等現(xiàn)象出現(xiàn),巨檢可見典型的肝結(jié)節(jié)、脾腫大、腹shui潴留、yi腺腫大、gao丸萎縮等特有癥狀,有的還出現(xiàn)shen硬化,光鏡檢查顯示,動物實驗課題外包選哪家,造模初期,肝組織呈小結(jié)節(jié)性脂肪gan硬化,隨著飼育時闖的延長,出現(xiàn)粗大的結(jié)節(jié)性或小葉性gan硬化。
(3)比較醫(yī)學(xué) 膳食不平衡或特種營養(yǎng)素缺乏可以導(dǎo)致動物肝細(xì)胞病變。實驗證明,長期喂食dan堿缺乏食物可誘發(fā)大鼠肝脂變、肝纖維化乃至gan硬化。本模型采用離乳大鼠是由于幼鼠在發(fā)育期階段對dan堿的需求量較大,因dan堿缺乏造成對機體傷害的敏感性自然比成年動物更強。但事實上,對dan堿缺乏的敏感性取決于體內(nèi)dan堿氧化酶的含量。人類gan臟不含dan堿氧化酶,不存在dan堿缺乏問題,所以此模型不適于在發(fā)病機制上進(jìn)行人類相關(guān)疾病的研究。不過,該模型由于fu制周期長,飼料配制復(fù)雜,花費大,現(xiàn)已少見有單用此方法造模者。此外,實驗中使用雄性動物雄鼠是因為雄性動物在向gan硬化轉(zhuǎn)化過程中比雌性動物更為均一。在飼料中混入微量的半胱氨酸具有促進(jìn)gan硬化發(fā)展的作用。
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