五、注意事項
1. 小宮設(shè)備和實驗程序與大鼠類似,但迷宮規(guī)格應(yīng)比大宮小,以免增加小鼠行為操作難度。
2. 本實驗也可只用來測定工作記憶。方法中不同的是,在所有臂均放置食粒,而不是只選4個臂放置食粒。
3. 慢性應(yīng)激對動物的迷宮操作可產(chǎn)生影響,上海動物實驗,且存在性別差異。經(jīng)過慢性應(yīng)激以后,雄性大鼠***減弱,表現(xiàn)為記憶錯誤頻率增加;雄性大鼠的空間記憶反而增強,表現(xiàn)為錯誤頻率減少。
4. 即使在限制進食條件下,也應(yīng)讓大鼠體重每周增加5g,以免動物因營養(yǎng)不良而患病。剔除身體狀態(tài)不良的動物。
5. 迷宮周圍的任何一件物品均可被動物用來作為空間定為的標(biāo)志。去除或移動這些標(biāo)志可能使動物操作困難并降低迷宮臂選擇的準(zhǔn)確性。
注意事項
1. 針頭大小與動物的種類有關(guān),t 同時針頭一定要磨鈍。
2. 檢查灌注泵的運作情況,一定排出管子的氣泡和空氣,防止空氣栓塞。
3. 經(jīng)腹腔暴腔,先清楚升主動脈外面的脂肪***和心外膜***。
4. 將針頭經(jīng)左心室插入升主動脈(顏色變白的哦),并用鉗子固定。
5. 解開右心耳,動物實驗外包,同時開啟灌注泵。注意,不要隨便揭開心臟的其他部位,否則有時候可能會灌注成功但是絕大部分會造成灌注不成功,實驗動物,尤其。
6. 將 4 度的生理鹽水(好已動物的發(fā)白為標(biāo)準(zhǔn),我們實驗室的大鼠約用 250ml)和多聚甲醛 (根據(jù)所取得材料而定) 依次灌入。
7. 整個過程均應(yīng)將動物放在冰上,以便于更好地保存目的蛋白和酶的活性。
6. 八臂迷宮實驗方法根據(jù)實驗?zāi)康牡牟煌詫m臂的數(shù)目可不同,包括8、16、24、32、40和48臂迷宮。迷宮臂越少要求動物記住探究過的臂也越小,動物的行為操作就越簡單。增加臂的數(shù)目一方面增加了對動物空間記憶的要求,另一方面也引入了更多的、有必要考慮的干擾因素(例如過去的迷宮學(xué)習(xí)對目前所測記憶的影響)。所以,通常使用8臂迷宮,既可減少不必要的、過多臂的干擾,又可縮短訓(xùn)練和測試所花的時間。
7. 所用食物通常為小塊的、帶巧克力味(動物喜歡的味道之一)或甜味的早餐圈(每塊10mg);也可用液體食物(如巧克力奶或水)。后者對于測試某些影響動物對固體食物吞咽的尤為實用。
8. 影響動物迷宮操作主要有兩大因素:對迷宮或觀察者的恐懼與動物探究習(xí)性和已知放在迷宮臂內(nèi)食物的驅(qū)使??謶忠蛩剡^強會阻止動物的迷宮操作,使動物始終停留在迷宮的某一個地方而不去探究。缺乏對食物的渴求也會產(chǎn)生類似結(jié)果,增加對動物的撫摸,必要時加高迷宮臂的側(cè)墻,有助于減少動物的恐懼。如食物的驅(qū)使作用不足,可減少食物量,但必須同時監(jiān)測體重和一般身體狀況。通常大鼠體重不應(yīng)低于禁食前的80%;對多數(shù)大鼠,體重降低15%即可。
9. 與水迷宮不同,臂迷宮適合反復(fù)測試或長期記憶的測試。一般認(rèn)為,工作記憶代表短期記憶,參考記憶代表長期記憶。
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