




難點與關鍵點
將灌注針插入主動脈內(nèi)是灌注固定的關鍵,也是難點。首先準確找到主動脈,這是此步驟的要點??捎脺厣睇}水將胸腔內(nèi)的血液沖洗干凈,用鑷子輕輕夾住心 外膜(夾的越少越好,以免影響取材)將心臟向左上方提起,即可看清主動脈,又可使灌注針很容易地插入主動脈內(nèi)。插入時動作要慢,動物模型實驗,針尖方向不要偏向右側,以 免刺入右心房,如果感到有阻力,則將針退后、調(diào)整方向重新進針,直到進入主動脈,灌注針進入主動脈后可在心臟的上方看到其位置,灌注針進入主動脈的長度 好為 3~5 毫米,然后用絲線扎緊。切勿將灌注針放在左心室內(nèi),這樣由于主動脈瓣的關閉,灌注液很難進入主動脈,而是沿著心室的切口流出,致使灌注失敗。另 外,灌注針插入成功后,一定要用剪刀剪開右心耳而不是右心室,這是灌流液的出口。剪開心尖的位置一定要掌握好,實驗動物模型公司,不能偏右使灌注針插入右心室。

五、注意事項
1. 小宮設備和實驗程序與大鼠類似,但迷宮規(guī)格應比大宮小,以免增加小鼠行為操作難度。
2. 本實驗也可只用來測定工作記憶。方法中不同的是,在所有臂均放置食粒,臨床前動物實驗,而不是只選4個臂放置食粒。
3. 慢性應激對動物的迷宮操作可產(chǎn)生影響,動物實驗,且存在性別差異。經(jīng)過慢性應激以后,雄性大鼠***減弱,表現(xiàn)為記憶錯誤頻率增加;雄性大鼠的空間記憶反而增強,表現(xiàn)為錯誤頻率減少。
4. 即使在限制進食條件下,也應讓大鼠體重每周增加5g,以免動物因營養(yǎng)不良而患病。剔除身體狀態(tài)不良的動物。
5. 迷宮周圍的任何一件物品均可被動物用來作為空間定為的標志。去除或移動這些標志可能使動物操作困難并降低迷宮臂選擇的準確性。

6. 八臂迷宮實驗方法根據(jù)實驗目的的不同迷宮臂的數(shù)目可不同,包括8、16、24、32、40和48臂迷宮。迷宮臂越少要求動物記住探究過的臂也越小,動物的行為操作就越簡單。增加臂的數(shù)目一方面增加了對動物空間記憶的要求,另一方面也引入了更多的、有必要考慮的干擾因素(例如過去的迷宮學習對目前所測記憶的影響)。所以,通常使用8臂迷宮,既可減少不必要的、過多臂的干擾,又可縮短訓練和測試所花的時間。
7. 所用食物通常為小塊的、帶巧克力味(動物喜歡的味道之一)或甜味的早餐圈(每塊10mg);也可用液體食物(如巧克力奶或水)。后者對于測試某些影響動物對固體食物吞咽的尤為實用。
8. 影響動物迷宮操作主要有兩大因素:對迷宮或觀察者的恐懼與動物探究習性和已知放在迷宮臂內(nèi)食物的驅使??謶忠蛩剡^強會阻止動物的迷宮操作,使動物始終停留在迷宮的某一個地方而不去探究。缺乏對食物的渴求也會產(chǎn)生類似結果,增加對動物的撫摸,必要時加高迷宮臂的側墻,有助于減少動物的恐懼。如食物的驅使作用不足,可減少食物量,但必須同時監(jiān)測體重和一般身體狀況。通常大鼠體重不應低于禁食前的80%;對多數(shù)大鼠,體重降低15%即可。
9. 與水迷宮不同,臂迷宮適合反復測試或長期記憶的測試。一般認為,工作記憶代表短期記憶,參考記憶代表長期記憶。
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