難點(diǎn)與關(guān)鍵點(diǎn)

將灌注針插入主動(dòng)脈內(nèi)是灌注固定的關(guān)鍵，也是難點(diǎn)。首先準(zhǔn)確找到主動(dòng)脈，這是此步驟的要點(diǎn)。可用溫生理鹽水將胸腔內(nèi)的血液沖洗干凈，用鑷子輕輕夾住心 外膜（夾的越少越好，以免影響取材）將心臟向左上方提起，即可看清主動(dòng)脈，又可使灌注針很容易地插入主動(dòng)脈內(nèi)。插入時(shí)動(dòng)作要慢，動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)，針尖方向不要偏向右側(cè)，以 免刺入右心房，如果感到有阻力，則將針退后、調(diào)整方向重新進(jìn)針，直到進(jìn)入主動(dòng)脈，灌注針進(jìn)入主動(dòng)脈后可在心臟的上方看到其位置，灌注針進(jìn)入主動(dòng)脈的長(zhǎng)度 好為 3~5 毫米，然后用絲線扎緊。切勿將灌注針?lè)旁谧笮氖覂?nèi)，這樣由于主動(dòng)脈瓣的關(guān)閉，灌注液很難進(jìn)入主動(dòng)脈，而是沿著心室的切口流出，致使灌注失敗。另 外，灌注針插入成功后，一定要用剪刀剪開(kāi)右心耳而不是右心室，這是灌流液的出口。剪開(kāi)心尖的位置一定要掌握好，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型公司，不能偏右使灌注針插入右心室。

五、注意事項(xiàng)

1．  小宮設(shè)備和實(shí)驗(yàn)程序與大鼠類(lèi)似，但迷宮規(guī)格應(yīng)比大宮小，以免增加小鼠行為操作難度。

2．  本實(shí)驗(yàn)也可只用來(lái)測(cè)定工作記憶。方法中不同的是，在所有臂均放置食粒，臨床前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，而不是只選4個(gè)臂放置食粒。

3．  慢性應(yīng)激對(duì)動(dòng)物的迷宮操作可產(chǎn)生影響，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，且存在性別差異。經(jīng)過(guò)慢性應(yīng)激以后，雄性大鼠***減弱，表現(xiàn)為記憶錯(cuò)誤頻率增加；雄性大鼠的空間記憶反而增強(qiáng)，表現(xiàn)為錯(cuò)誤頻率減少。

4．  即使在限制進(jìn)食條件下，也應(yīng)讓大鼠體重每周增加5g，以免動(dòng)物因營(yíng)養(yǎng)不良而患病。剔除身體狀態(tài)不良的動(dòng)物。

5．  迷宮周?chē)娜魏我患锲肪杀粍?dòng)物用來(lái)作為空間定為的標(biāo)志。去除或移動(dòng)這些標(biāo)志可能使動(dòng)物操作困難并降低迷宮臂選擇的準(zhǔn)確性。

6．  八臂迷宮實(shí)驗(yàn)方法根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡牟煌詫m臂的數(shù)目可不同，包括8、16、24、32、40和48臂迷宮。迷宮臂越少要求動(dòng)物記住探究過(guò)的臂也越小，動(dòng)物的行為操作就越簡(jiǎn)單。增加臂的數(shù)目一方面增加了對(duì)動(dòng)物空間記憶的要求，另一方面也引入了更多的、有必要考慮的干擾因素（例如過(guò)去的迷宮學(xué)習(xí)對(duì)目前所測(cè)記憶的影響）。所以，通常使用8臂迷宮，既可減少不必要的、過(guò)多臂的干擾，又可縮短訓(xùn)練和測(cè)試所花的時(shí)間。

7．  所用食物通常為小塊的、帶巧克力味（動(dòng)物喜歡的味道之一）或甜味的早餐圈（每塊10mg）；也可用液體食物（如巧克力奶或水）。后者對(duì)于測(cè)試某些影響動(dòng)物對(duì)固體食物吞咽的尤為實(shí)用。

8．  影響動(dòng)物迷宮操作主要有兩大因素：對(duì)迷宮或觀察者的恐懼與動(dòng)物探究習(xí)性和已知放在迷宮臂內(nèi)食物的驅(qū)使?？謶忠蛩剡^(guò)強(qiáng)會(huì)阻止動(dòng)物的迷宮操作，使動(dòng)物始終停留在迷宮的某一個(gè)地方而不去探究。缺乏對(duì)食物的渴求也會(huì)產(chǎn)生類(lèi)似結(jié)果，增加對(duì)動(dòng)物的撫摸，必要時(shí)加高迷宮臂的側(cè)墻，有助于減少動(dòng)物的恐懼。如食物的驅(qū)使作用不足，可減少食物量，但必須同時(shí)監(jiān)測(cè)體重和一般身體狀況。通常大鼠體重不應(yīng)低于禁食前的80%；對(duì)多數(shù)大鼠，體重降低15%即可。

9．  與水迷宮不同，臂迷宮適合反復(fù)測(cè)試或長(zhǎng)期記憶的測(cè)試。一般認(rèn)為，工作記憶代表短期記憶，參考記憶代表長(zhǎng)期記憶。

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