五、注意事項
1. 小宮設(shè)備和實(shí)驗(yàn)程序與大鼠類似,但迷宮規(guī)格應(yīng)比大宮小,以免增加小鼠行為操作難度。
2. 本實(shí)驗(yàn)也可只用來測定工作記憶。方法中不同的是,在所有臂均放置食粒,而不是只選4個臂放置食粒。
3. 慢性應(yīng)激對動物的迷宮操作可產(chǎn)生影響,且存在性別差異。經(jīng)過慢性應(yīng)激以后,雄性大鼠***減弱,表現(xiàn)為記憶錯誤頻率增加;雄性大鼠的空間記憶反而增強(qiáng),表現(xiàn)為錯誤頻率減少。
4. 即使在限制進(jìn)食條件下,也應(yīng)讓大鼠體重每周增加5g,以免動物因營養(yǎng)不良而患病。剔除身體狀態(tài)不良的動物。
5. 迷宮周圍的任何一件物品均可被動物用來作為空間定為的標(biāo)志。去除或移動這些標(biāo)志可能使動物操作困難并降低迷宮臂選擇的準(zhǔn)確性。
灌注固定主要用于***系統(tǒng),可以做動物實(shí)驗(yàn)的公司,其他***意義不是很大,而且耗時耗力。對***系統(tǒng)防止變性效果較好!
小鼠灌注
灌流固定小鼠時一般采用輸液器的針頭 (4 號半,這樣肉眼可見就是肺部明顯充氣脹大變白,動物實(shí)驗(yàn),針頭要從心軸方向進(jìn)針,然后刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了,開始灌流后剪破右心耳,約 40 毫升生理鹽水,后再灌流約 20 毫升多聚甲醛,整個灌流固定的過程就完成了。
灌注固定主要用于***系統(tǒng),其他***意義不是很大,而且耗時耗力。對***系統(tǒng)防止變性效果較好!
小鼠灌注
灌流固定小鼠時一般采用輸液器的針頭 (4 號半,這樣肉眼可見就是肺部明顯充氣脹大變白,針頭要從心軸方向進(jìn)針,然后刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了,開始灌流后剪破右心耳,約 40 毫升生理鹽水,后再灌流約 20 毫升多聚甲醛,整個灌流固定的過程就完成了。
在各種致病因素作用下,實(shí)驗(yàn)動物,大腦實(shí)質(zhì)受到損傷后可出現(xiàn)***功能改變,如偏癱、平衡失調(diào)等。
對于***系統(tǒng)***動物模型而言,造模結(jié)束只是步,驗(yàn)證個體模型是否成功是第二步,而控制組內(nèi)個體特征一致性是第三步。
采用***功能評分是重要的觀察指標(biāo),可以用來在體評價模型是否成功或者病變嚴(yán)重程度。盡量控制動物模型的評分一致性是很困難但不得不做的一件事。
這里介紹三種常見的嚙齒類***功能評分方法。
一、【Longa評分法】
① 無***功能缺陷:0分;
②癱瘓側(cè)前爪不能完全伸展:1分;
③行走時向癱瘓側(cè)轉(zhuǎn)圈:2分;
④行走時向癱瘓側(cè)傾倒:3分;
⑤不能自動行走,存在意識喪失現(xiàn)象:4分。
二、【Bederson評分法】
抓起動物的尾巴,使動物離臺面10cm高。此時,正常大鼠的前爪處于伸直狀態(tài),而存在***功能病變的動物則可出現(xiàn)如下表現(xiàn):
① 無***功能缺陷:0分;
②動物尾巴提起后,癱瘓側(cè)前肢回收并屈于腹下,而正常側(cè)肢體伸向臺面:1分;
③除第二條表現(xiàn)以外,俯臥于臺面時向癱瘓側(cè)側(cè)推動物的阻力較正常側(cè)明顯降低:2分;
④除條和第二條以外,動物行走時向癱瘓側(cè)旋轉(zhuǎn):3分。
三、【平衡木評分法】
一根長為80cm、寬為2.5cm的木條,水平固定在離臺面10cm高度的地方,臨床前動物實(shí)驗(yàn),然后讓動物在木條上行走。
①能跳上平衡木條,可以自由行走但不跌倒:0分;
②能跳上平衡木條,動物在上面行走會跌下,但跌下的機(jī)會小于50%:1分;
③能跳上平衡木條,動物在上面行走會跌下,但跌下的機(jī)會大于50%:2分;
④動物在正常側(cè)身體的幫助下可以跳上平衡木條;但是癱瘓側(cè)的后肢不能夠幫助身體向前移動:3分;
⑤動物無法在平衡木條上行走,但是可以坐在木條上:4分;
⑥將動物放在木條上,動物很快會掉落下來:5分。
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