6. 八臂迷宮實(shí)驗(yàn)方法根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡牟煌詫m臂的數(shù)目可不同,包括8、16、24、32、40和48臂迷宮。迷宮臂越少要求動(dòng)物記住探究過的臂也越小,動(dòng)物的行為操作就越簡(jiǎn)單。增加臂的數(shù)目一方面增加了對(duì)動(dòng)物空間記憶的要求,另一方面也引入了更多的、有必要考慮的干擾因素(例如過去的迷宮學(xué)習(xí)對(duì)目前所測(cè)記憶的影響)。所以,通常使用8臂迷宮,既可減少不必要的、過多臂的干擾,又可縮短訓(xùn)練和測(cè)試所花的時(shí)間。
7. 所用食物通常為小塊的、帶巧克力味(動(dòng)物喜歡的味道之一)或甜味的早餐圈(每塊10mg);也可用液體食物(如巧克力奶或水)。后者對(duì)于測(cè)試某些影響動(dòng)物對(duì)固體食物吞咽的尤為實(shí)用。
8. 影響動(dòng)物迷宮操作主要有兩大因素:對(duì)迷宮或觀察者的恐懼與動(dòng)物探究習(xí)性和已知放在迷宮臂內(nèi)食物的驅(qū)使。恐懼因素過強(qiáng)會(huì)阻止動(dòng)物的迷宮操作,使動(dòng)物始終停留在迷宮的某一個(gè)地方而不去探究。缺乏對(duì)食物的渴求也會(huì)產(chǎn)生類似結(jié)果,增加對(duì)動(dòng)物的撫摸,必要時(shí)加高迷宮臂的側(cè)墻,有助于減少動(dòng)物的恐懼。如食物的驅(qū)使作用不足,疾病動(dòng)物模型購(gòu)買,可減少食物量,基因敲除小鼠,但必須同時(shí)監(jiān)測(cè)體重和一般身體狀況。通常大鼠體重不應(yīng)低于禁食前的80%;對(duì)多數(shù)大鼠,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,體重降低15%即可。
9. 與水迷宮不同,臂迷宮適合反復(fù)測(cè)試或長(zhǎng)期記憶的測(cè)試。一般認(rèn)為,工作記憶代表短期記憶,參考記憶代表長(zhǎng)期記憶。
灌注固定主要用于神經(jīng)系統(tǒng),其他組織意義不是很大,而且耗時(shí)耗力。對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)防止變性效果較好!
小鼠灌注
灌流固定小鼠時(shí)一般采用輸液器的針頭 (4 號(hào)半,這樣肉眼可見就是肺部明顯充氣脹大變白,針頭要從心軸方向進(jìn)針,然后刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了,開始灌流后剪破右心耳,約 40 毫升生理鹽水,后再灌流約 20 毫升多聚甲醛,整個(gè)灌流固定的過程就完成了。
灌注固定主要用于神經(jīng)系統(tǒng),其他組織意義不是很大,而且耗時(shí)耗力。對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)防止變性效果較好!
小鼠灌注
灌流固定小鼠時(shí)一般采用輸液器的針頭 (4 號(hào)半,這樣肉眼可見就是肺部明顯充氣脹大變白,針頭要從心軸方向進(jìn)針,然后刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了,開始灌流后剪破右心耳,約 40 毫升生理鹽水,后再灌流約 20 毫升多聚甲醛,整個(gè)灌流固定的過程就完成了。
在各種致病因素作用下,大腦實(shí)質(zhì)受到損傷后可出現(xiàn)神經(jīng)功能改變,如偏癱、平衡失調(diào)等。
對(duì)于神經(jīng)系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型而言,造模結(jié)束只是步,驗(yàn)證個(gè)體模型是否成功是第二步,而控制組內(nèi)個(gè)體特征一致性是第三步。
采用神經(jīng)功能評(píng)分是重要的觀察指標(biāo),可以用來在體評(píng)價(jià)模型是否成功或者病變嚴(yán)重程度。盡量控制動(dòng)物模型的評(píng)分一致性是很困難但不得不做的一件事。
這里介紹三種常見的嚙齒類神經(jīng)功能評(píng)分方法。
一、【Longa評(píng)分法】
① 無神經(jīng)功能缺陷:0分;
②癱瘓側(cè)前爪不能完全伸展:1分;
③行走時(shí)向癱瘓側(cè)轉(zhuǎn)圈:2分;
④行走時(shí)向癱瘓側(cè)傾倒:3分;
⑤不能自動(dòng)行走,存在意識(shí)喪失現(xiàn)象:4分。
二、【Bederson評(píng)分法】
抓起動(dòng)物的尾巴,使動(dòng)物離臺(tái)面10cm高。此時(shí),正常大鼠的前爪處于伸直狀態(tài),而存在神經(jīng)功能病變的動(dòng)物則可出現(xiàn)如下表現(xiàn):
① 無神經(jīng)功能缺陷:0分;
②動(dòng)物尾巴提起后,癱瘓側(cè)前肢回收并屈于腹下,而正常側(cè)肢體伸向臺(tái)面:1分;
③除第二條表現(xiàn)以外,俯臥于臺(tái)面時(shí)向癱瘓側(cè)側(cè)推動(dòng)物的阻力較正常側(cè)明顯降低:2分;
④除條和第二條以外,動(dòng)物行走時(shí)向癱瘓側(cè)旋轉(zhuǎn):3分。
三、【平衡木評(píng)分法】
一根長(zhǎng)為80cm、寬為2.5cm的木條,水平固定在離臺(tái)面10cm高度的地方,然后讓動(dòng)物在木條上行走。
①能跳上平衡木條,可以自由行走但不跌倒:0分;
②能跳上平衡木條,北京動(dòng)物模型,動(dòng)物在上面行走會(huì)跌下,但跌下的機(jī)會(huì)小于50%:1分;
③能跳上平衡木條,動(dòng)物在上面行走會(huì)跌下,但跌下的機(jī)會(huì)大于50%:2分;
④動(dòng)物在正常側(cè)身體的幫助下可以跳上平衡木條;但是癱瘓側(cè)的后肢不能夠幫助身體向前移動(dòng):3分;
⑤動(dòng)物無法在平衡木條上行走,但是可以坐在木條上:4分;
⑥將動(dòng)物放在木條上,動(dòng)物很快會(huì)掉落下來:5分。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物-英瀚斯生物科技公司-北京動(dòng)物模型由南京英瀚斯生物科技有限公司提供。南京英瀚斯生物科技有限公司是從事“組織病理,細(xì)胞生物,分子生物學(xué)平臺(tái),動(dòng)物模型科研外包服務(wù)”的企業(yè),公司秉承“誠(chéng)信經(jīng)營(yíng),用心服務(wù)”的理念,為您提供更好的產(chǎn)品和服務(wù)。歡迎來電咨詢!聯(lián)系人:戴經(jīng)理。