膿毒癥模型

膿毒癥模型方法及原理

一般構(gòu)建膿毒癥模型有多種方式，例如***攻擊、內(nèi)毒su攻擊、腹膜炎攻擊等，針對小鼠較為經(jīng)典的方法為盲腸jie扎穿刺（CLP）。此方法屬于腹膜炎攻擊方法的一種，主要是通過***方式將小鼠自身盲腸內(nèi)容物釋放到腹腔造成gan染，從而模擬膿毒癥的發(fā)生和發(fā)展。

實(shí)驗(yàn)方法

Step1：常規(guī)方法ma醉小鼠，剔除腹部毛發(fā)，酒精消毒

Step2：腹部正中開口，逐層打開皮膚和腹膜，暴露盲腸

Step3：使用銳器刺穿盲腸尾部1/2位置，擠出內(nèi)容物

Step4：放置引流物，時(shí)盲腸內(nèi)容物可持續(xù)流出

Step5：逐層縫合皮膚，***實(shí)驗(yàn)外包，碘伏消毒，將小鼠放回籠內(nèi)飼養(yǎng)

實(shí)驗(yàn)動物的采集方法

1. 大鼠、小鼠的采集：用***脫臼法處死動物，剝離出胸骨或股骨，用吸取少量的Hank平衡鹽溶液，沖洗出胸骨或股骨中全部液。如果是取少量的作檢查，可將胸骨或股骨剪斷，將其斷面的擠在有稀釋液的玻片上，混勻后涂片涼干即可染色檢查。

2. 大動物的采集：狗等大動物的采集可采取穿刺方法。 先將動物、固定、局部除毛、消毒皮膚，然后估計(jì)好皮膚到的距離，把穿刺針的長度固定好。操作人員用左手把穿刺點(diǎn)周圍的皮膚繃緊，右手將穿刺針在穿刺點(diǎn)垂直刺入，穿入固定后，輕輕左右旋轉(zhuǎn)將穿刺針鉆入，當(dāng)穿刺針進(jìn)入腔時(shí)常有落空感。狗的采集，一般采用髂骨穿刺。

狗等大動物常用的穿刺點(diǎn)：胸骨：穿刺部位是胸骨體與胸骨柄連接處。肋骨：穿刺部位是第5～7肋骨各點(diǎn)的中點(diǎn)。脛骨：穿刺部位是股骨內(nèi)側(cè)、靠下端的凹面處。如果穿刺采用的是肋骨，穿刺結(jié)束后要用膠布封貼穿刺孔，防止發(fā)生。

實(shí)驗(yàn)動物的選擇在此，***實(shí)驗(yàn)外包費(fèi)用，提幾點(diǎn)原則和方法。

第①，做什么樣的實(shí)驗(yàn)？什么動物適合本實(shí)驗(yàn)？做什么實(shí)驗(yàn)，這是選題時(shí)就確定好了的?？隙ㄊ墙?jīng)過論證的。無需多講。用什么樣的動物呢？我想，大多是參照文獻(xiàn)，再結(jié)合自己對實(shí)驗(yàn)動物的了解。選題之時(shí)就肯定閱讀過很多文獻(xiàn)了，因此不會陌生。

如：做高、動脈粥樣硬化，我想大多數(shù)人會選擇大鼠、兔子，也可以選金黃地鼠、鵪鶉，少數(shù)人會選小鼠，但我想用狗和猴的基本上不會有吧。因?yàn)橐x擇比較容易形成此***的動物，且要易得。

所以，對于不太熟悉的人來說，要多看文獻(xiàn)，參考別人是如何選擇的。就算是對動物比較了解，系統(tǒng)學(xué)過這方面知識的，也要多看文獻(xiàn)，綜合權(quán)衡。切忌隨意地憑空想像。

第二，***實(shí)驗(yàn)外包哪家好，采取什么樣的方法造模？做動物實(shí)驗(yàn)通常是要造模的。選擇什么樣的方式？這要從實(shí)驗(yàn)的目的及條件入手。造，可以用***，也可以用。其中有四氧及鏈脲佐菌素（STZ）。后者用得較多，且為國際認(rèn)同。

而四氧目前用得較少了。造模方法一是參照《藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》，二是參照文獻(xiàn)。造模方法有時(shí)也決定了你的動物選擇。像做***造動脈粥樣硬化，我想用大鼠比小鼠來得方便吧？

第三，經(jīng)費(fèi)承受能力如何？做實(shí)驗(yàn)也要精打細(xì)算。不可能為了所謂的高水平、技術(shù)而不顧實(shí)驗(yàn)室的條件。像做高脂動物模型，假設(shè)經(jīng)費(fèi)只有一萬多元，一定要弄個(gè)敲除APoE***的小鼠來做，恐怕沒人認(rèn)同。做一個(gè)簡單的鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)，陜西***實(shí)驗(yàn)，你非得要用SPF實(shí)驗(yàn)室，這也是不太實(shí)際的，也是沒必要的。

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