條帶拖尾
1. 原因:蛋白量太大,一抗?jié)舛绕吆头跤龝r(shí)間太長;
2. 優(yōu)化:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整上樣蛋白量,調(diào)整一抗?jié)舛群蜁r(shí)間;
3. 解析:這種情況也是常見問題,上樣蛋白量一般會做預(yù)實(shí)驗(yàn)避免;還有容易發(fā)生的是一抗?jié)舛忍?,作用時(shí)間太長引起的,品牌一抗都有稀釋比例建議;再個(gè)質(zhì)量好的一抗直接37度孵育半小時(shí)就好,無需孵育過夜;再強(qiáng)調(diào)一遍洗膜千萬不要偷懶,次數(shù)和時(shí)間洗到位,不要擔(dān)心把***和蛋白洗掉沒那么脆弱。
LHRH靶向甲氨0蝶呤人血0清白蛋白納米粒對4T1荷瘤Balb/c小鼠的體內(nèi)抗腫0瘤活性。
GnRH受體抗0體(FITC)orb15686 PubMed 22531853國際藥劑學(xué)雜志
低劑量氨基雙0酸鹽刺激角質(zhì)形成細(xì)胞生長,使糖皮質(zhì)激0素受體失活。
糖皮質(zhì)激0素受體(磷酸化-Ser211)抗0體(FITC)orb8958 PubMed 24063859歐洲藥理學(xué)雜志
其他問題
1. 條帶連成一片。多數(shù)原因是上樣量過多,其次是樣品彌散或中途停止了電泳;
2. 條帶偏高或者偏低。常有可能是蛋白有修飾現(xiàn)象;還有可能是膠的濃度與目的蛋白的濃度不對應(yīng),例如說100KD以上的蛋白用的12%膠跑,或者說20KD的蛋白用的6%膠跑;再是蛋白有降解,會在比原來位置低的地方出現(xiàn)主帶,Mlkl兔多抗,跟著出現(xiàn)一些其他條帶,明顯現(xiàn)象是所有的條帶比正常的都低,且條帶模糊不清晰。
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