轉(zhuǎn)1基因技術(shù)是伴隨著對(duì)生物體的認(rèn)識(shí)才發(fā)展起來(lái)的技術(shù)，在生物本身還未完完全全地認(rèn)識(shí)的情況下進(jìn)行基因?qū)哟蔚男揎?，出現(xiàn)預(yù)料不到的結(jié)果和不確定性與不能解釋的情況是肯定的。其造成各種不確定性的來(lái)源包括:    基因從原有機(jī)體轉(zhuǎn)人宿主有機(jī)體中，兩者的生理的差異對(duì)終產(chǎn)物影響而導(dǎo)致的安全性問題。

    轉(zhuǎn)移的基因結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性。確保經(jīng)遺傳修改的生物已獲得要表達(dá)良性性狀所需的zui小DNA部分片段，由于DNA結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定有助于性狀表達(dá)的穩(wěn)定，額外的DNA部分片段可能導(dǎo)致基因沉默或終產(chǎn)物的表達(dá)不穩(wěn)定，甚至產(chǎn)生不需要的性狀或有毒物質(zhì)。    基因插人受體基因組的位置和拷貝數(shù)的不確定性。無(wú)論是農(nóng)桿1菌介導(dǎo)法、基因法、花粉管通道法、PEG介導(dǎo)電1擊法等，質(zhì)粒在進(jìn)人宿主基因組的位置與數(shù)量均是不確定的，目的基因的表達(dá)量難以預(yù)料，同一批的轉(zhuǎn)1基因材料可能存在差異。

    轉(zhuǎn)1基因載體引起的不確定性。食用具抗生1素耐藥性的選擇性標(biāo)識(shí)基因可能會(huì)影響人的抗病能力。Netherwood等分別讓7個(gè)腸道炎的和12個(gè)健康的志愿者食用添加轉(zhuǎn)1基因大豆(EPSPS)的漢堡和豆奶昔，雖然在12個(gè)健康個(gè)體的糞便中沒有發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)1基因，但在7個(gè)腸道炎志愿者的xiao腸中都發(fā)現(xiàn)了轉(zhuǎn)1基因，其中的3個(gè)出現(xiàn)有轉(zhuǎn)1基因向腸道微生物轉(zhuǎn)移的現(xiàn)象，即有可能抗生1素標(biāo)記會(huì)轉(zhuǎn)移到腸道微生物上。

基因?qū)爰?xì)胞常用方法

轉(zhuǎn)染

　 重組的噬菌體DNA也可象質(zhì)粒DNA的方式進(jìn)入宿主菌，即宿主菌先經(jīng)過CaCl2，電穿孔等處理成感受態(tài)細(xì)菌再接受DNA，逆轉(zhuǎn)錄病毒滴度測(cè)定，進(jìn)入感受態(tài)細(xì)菌的噬菌體DNA可以同樣copy和繁殖，這種方式稱為轉(zhuǎn)染（transfection）。M13噬菌體DNA導(dǎo)入大腸桿1菌就常用轉(zhuǎn)染的方法。重組DNA進(jìn)入宿主細(xì)胞也常用轉(zhuǎn)染方式。zui經(jīng)典的是1973年建立的磷酸鈣法，其利用的基本現(xiàn)象是：DNA如以磷酸鈣-DNA共沉淀物形式出現(xiàn)時(shí)，培養(yǎng)細(xì)胞攝取DNA的效率會(huì)顯著提高。用電穿孔法處理培養(yǎng)的哺乳類細(xì)胞也能提高細(xì)胞攝取DNA能力，但所用外加電場(chǎng)的強(qiáng)度、電脈沖的長(zhǎng)度等條件與處理細(xì)菌者都很不相同。用人工脂質(zhì)膜包裹DNA，形成的脂質(zhì)體可以通過與細(xì)胞膜融合而將DNA導(dǎo)入細(xì)胞，方法簡(jiǎn)單而有效，但缺點(diǎn)是有細(xì)胞毒性和血1清的不親和性，近年來(lái)人們發(fā)現(xiàn)了一種更為有效的轉(zhuǎn)染試劑－陽(yáng)離子聚合物，其克服了脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑細(xì)胞毒性大，在體內(nèi)易被血1清清除等缺點(diǎn)，具有轉(zhuǎn)染效率1高，操作簡(jiǎn)單而日益受到重視。

基因是控制生物性狀的基本遺傳單位。19世紀(jì)60年代，奧地利遺傳學(xué)家格雷戈?duì)枴っ系聽柧吞岢隽松锏男誀钍怯蛇z傳因子控制的觀點(diǎn)，但這僅僅是一種邏輯推理。20世紀(jì)初期，遺傳學(xué)家摩爾根通過果蠅的遺傳實(shí)驗(yàn)，認(rèn)識(shí)到基因存在于染色體上，并且在染色體上是呈線性排列，從而得出了染色體是基因載體的結(jié)論。1909年丹麥遺傳學(xué)家約翰遜（W. Johansen，1859～1927）在《精密遺傳學(xué)原理》一書中正式提出“基因”概念。



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