細胞凍存離心問題
目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),CS250凍存袋哪家好,第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除 DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了會受壓過大, 。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒***,凍存袋哪家好,所以須將離心后的液 體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇,結(jié)果無有異常。
凍存袋的背景知識
采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細胞存活。標準冷凍速度開始為-1 到 -2℃/min,當溫度低于-25℃時可加速,到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-196℃)。細胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實驗證明這樣可以的保存細胞活力。如今細胞凍存多采用甘油或二亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少細胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。
凍存袋技術(shù)
是將細胞放在低溫環(huán)境,200-074-401凍存袋哪家好,減少細胞代謝,以便長期儲存的一種技術(shù)。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一,起到了細胞保種的作用。利用凍存技術(shù)將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,200-074-401凍存袋哪家好,這樣在需要的時候再復(fù)蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。
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