凍存袋的應(yīng)用
對于需要保存5年以上的體外細胞的方法,-196°℃的深低溫液氮保存簡便,實用.凍存后的細胞損傷小活力高能保障患者移植后造血功能的早期***,反之則導(dǎo)致造血功能***的延遲甚至失敗.原有的液氮罐保存方式是將裝有千細胞的凍存袋放入圓筒狀的容器中后,再放入液氮罐中保存,由于凍存袋與圓筒狀的容器形狀尺寸的不匹配冷凍保存時會造成凍存袋的變形導(dǎo)致千細胞被擠壓受損甚至消滅,CS50凍存袋哪家好,且受液氮罐空間限制能凍存的數(shù)量有限.針對如何經(jīng)濟,較大容量的保存細胞.
凍存袋的作用
適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。除此之外,還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。 細胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑--終濃度5%.15%的甘油或二亞砜(DMSO),可使溶液冰點降低,CS250凍存袋哪家好,加之在緩慢***條件下,細胞內(nèi)水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細胞損傷。
凍存袋注意事項
1.欲冷凍保存之細胞應(yīng)在生長良好且存活率高之狀態(tài),約為80~90%致密度。
冷凍前檢測細胞是否仍保有其特有性質(zhì),例如hybridoma應(yīng)在冷凍保存前一至二日測試是否有antibody之產(chǎn)生。
2.細胞在液氮中可長期凍存沒有時間限制,而不會影響細胞活力﹔在-70度可保存數(shù)月。注意冷凍保護劑之品質(zhì)。
DMSO應(yīng)為***級等級,無菌且無色是直接購買無菌產(chǎn)品,以5~10m1小體積分裝,4℃避光保存,勿作多次解凍。
3.凍存細胞數(shù)量要足夠。無論再怎么小心,凍存袋哪家好,細胞在冷凍和復(fù)蘇過程中總會死掉一批的。所以,一開始凍存細胞的數(shù)量要足夠。一般要達到5× 10^6 /毫升,一瓶不夠兩瓶湊。但是,200-074-401凍存袋哪家好,這個不能一概而論。有些細胞,比如雜交瘤細胞,只需要1-3x 10^6 /毫升
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