凍存袋的歷史起源

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)創(chuàng)建于1907年，凍存袋報(bào)價(jià)，歷經(jīng)一個(gè)世紀(jì)磨練與升華，現(xiàn)已成為自然科學(xué)領(lǐng)域不可缺少的研究方法之一。小伙伴們要想在如今細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)廣泛滲透的科學(xué)研究領(lǐng)域搞好科研，基礎(chǔ)的細(xì)胞株的冷凍保存和解凍復(fù)蘇技術(shù)自然不能忽視。細(xì)胞凍存是將細(xì)胞放在低溫環(huán)境，減少細(xì)胞代謝，以便長(zhǎng)期儲(chǔ)存的一種技術(shù)。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一，起到了細(xì)胞保種的作用。

細(xì)胞凍存步驟

1.用移液器吸走原培養(yǎng)基，加入適量PBS洗1-2遍;

2.加入適量胰酶，置于培養(yǎng)箱中消化;

3.待消化到位后加入適量血漿或完全培養(yǎng)基終止消化，800-1000rpm離心3-5min;

4.配制凍存液，待細(xì)胞離心后去上清，加入凍存液重懸，調(diào)整細(xì)胞濃度為3×106~1×107 cells/mL，轉(zhuǎn)移到凍存管中;

5.將凍存管放入程序降溫盒中，200-074-400凍存袋報(bào)價(jià)，-80度過(guò)夜，然后轉(zhuǎn)移到液氮中保存。

6.凍存細(xì)胞后應(yīng)取出一管復(fù)蘇，檢測(cè)細(xì)胞的存活率。理論上細(xì)胞可在液氮內(nèi)長(zhǎng)期保存，

為穩(wěn)妥起見(jiàn)可在細(xì)胞凍存半年后復(fù)蘇培養(yǎng)，觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，再繼續(xù)凍存

凍存袋的基本原理

利用細(xì)胞凍存的形式來(lái)購(gòu)買(mǎi)、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。 細(xì)胞凍存時(shí)向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度5%．15%的甘油或DMSO，可使溶液冰點(diǎn)降低，加之在緩慢***條件下，CS50凍存袋報(bào)價(jià)，細(xì)胞內(nèi)水分透出，減少了冰晶形成，從而避免細(xì)胞損傷。 采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細(xì)胞存活。標(biāo)準(zhǔn)冷凍速度開(kāi)始為-1 到 -2℃/min，當(dāng)溫度低于-25℃時(shí)可加速，到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-196℃)。

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