凍存袋實驗前的準備
生長良好之培養(yǎng)細胞、新鮮培養(yǎng)基、DMSO、無菌塑料冷凍保存管(Nalgene 5000-0020)、等速降溫機
冷凍方法理論準備:
(1)傳統(tǒng)方法:冷存管置于4℃10分鐘--->-20℃30分鐘--->-8O℃16~18小時(或隔夜)--->液氮槽長期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止胞內(nèi)冰晶過大,造成細胞大量消失,CS250凍存袋代理,亦可跳過此步驟直接放入-8O℃冰箱中。
(2)程序降溫:利用已設定程序的等速降溫機以-1~-3℃/分鐘之速度由室溫降至(-8o℃以下) -120℃,200-074-401凍存袋代理,再放在液氮槽長期儲存。適用于懸浮型細胞與hybridoma之保存。
凍存袋,可千萬別這么用哈!
1.不要使用金屬管夾
2.不要離心
3.不要在凍存袋上直接寫字標識凍存細胞的信息
4.不要在凍存袋表面粘帖標簽不推薦使用同一凍存袋多次凍融細胞
5.DMSO稀釋以后才能放進凍存袋,DMSO濃度不要超過10%
6.復蘇細胞時建議把凍存袋放在一個保護袋中進行融化
7.不要超過凍存袋推薦的工作體積
凍存采血袋的優(yōu)點
采血袋通過連接導管與一三通管相連;所述一三通管的三個孔設置方向為兩個并列相反,CS50凍存袋代理,一個向下方向,分別連接采血袋;第二三通管和轉移袋;所述第二三通管的三個孔分別連接轉移袋,細胞培養(yǎng)袋和細胞凍存袋;所述采血袋上設置有阻塞件,凍存袋代理,所述阻塞件由PVC套管和PC折芯組成;所述采血管;一三通管的主管和支管,第二三通管的主管和支管均設有止流夾.本實用新型提供的用于細胞培養(yǎng)的凍存袋從采血到所需成分冷凍保存一步到位減少了成分污染,保障了成分質量要求.
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