細(xì)胞凍存離心問題
目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè),去除 DMSO,去除死細(xì)胞,這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間,轉(zhuǎn)的不夠沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了會(huì)受壓過大, 。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二亞砜(DMSO),DMSO對細(xì)胞有一定的毒***,CS250凍存袋哪家好,所以須將離心后的液 體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無有異常。
細(xì)胞凍存的方法
1.細(xì)胞:選對數(shù)生長期細(xì)胞,收集細(xì)胞24小時(shí)前換液一次。
2.計(jì)數(shù):按常規(guī)方法把細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù),令細(xì)胞密度達(dá)5×106/ml,離心去上清,吸入離心管中。
3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,CS250凍存袋代理,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。
4.分裝:分裝入無菌安剖中,每安剖加1.5毫升細(xì)胞懸液。
5.封口:用塑料安剖時(shí)擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細(xì)檢查,定要封嚴(yán),必要時(shí)可浸入藍(lán)色液中觀察,為安全起見,把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時(shí)因受熱發(fā)生傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,CS250凍存袋多少錢,注明:細(xì)胞名稱,凍存日期,CS250凍存袋,以便日后查找。
細(xì)胞凍存運(yùn)輸裝置技術(shù)領(lǐng)域
公開了一種凍存袋運(yùn)輸穩(wěn)定裝置,其包括頂部開口的筒體,所述筒體的底部設(shè)有若干通孔,所述筒體的內(nèi)部間隔設(shè)有若干隔板,所述筒體內(nèi)部位于各所述隔板的兩側(cè)分別設(shè)有限位板,所述限位板與各所述隔板的同—側(cè)相連;相鄰兩所述隔板與兩側(cè)的所述限位板之間限定有用于放置凍存袋的儲(chǔ)藏空間.本實(shí)用新型的有益效果在于:
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