凍存袋臨時儲罐
公開了一種細(xì)胞凍存袋樣本臨時儲罐,儲罐本體設(shè)有罐體,罐蓋,凍存架儲存格結(jié)構(gòu),罐體和罐蓋可將儲罐本體形成密封腔體,罐體頂部為密封結(jié)構(gòu),罐體頂部設(shè)有圓孔,罐蓋的尺寸和圓孔的尺寸相互匹配,罐蓋可覆蓋在圓孔之上形成密封腔體,所述的凍存架儲存格結(jié)構(gòu)包括軸承,凍存袋多少錢,軸承底部設(shè)有底盤,底盤上設(shè)有隔板.隔板的數(shù)量為多個,多個隔板將底盤分隔為多個儲存格.通過設(shè)計,縮小了蓋口,CS50凍存袋多少錢,減少了液氮逃逸,節(jié)省成本,凍存架放置于單獨(dú)的格子里有利于凍存位置管理,達(dá)到快速取放,尤其是整體凍存架快速取放轉(zhuǎn)移的目的.
細(xì)胞凍存袋操作需要注意?
1.細(xì)胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時1ml細(xì)胞液要加10ml-15m培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。
2.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細(xì)胞濃度過低,不利于細(xì)胞的貼壁。
3.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題是DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響 細(xì)胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是 10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
凍存袋細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟
1.操作人員應(yīng)戴防護(hù)面罩及手套,防止冷凍管可能爆裂之傷害。
2.自液氮或干冰容器中取出冷凍管,檢查蓋子是否旋緊,由于熱脹冷縮過程,此時蓋子易松掉。
3.將新鮮培養(yǎng)基置于37℃水槽中回溫,回溫后噴以70酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。
4.取出冷凍管,CS250凍存袋多少錢,立即放入3℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,以7O%酒精擦拭保存管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。
5.取出解凍之細(xì)胞懸浮液,緩緩加入有培養(yǎng)基之培養(yǎng)容器內(nèi)(稀釋比例為1:10~1:15),混合均勻,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。取0.1m1解凍細(xì)胞懸浮液作存活測試。
6.解凍后是否立即去除冷凍保護(hù)劑,依細(xì)胞種類而異,一般而言,大都不需要立即去除冷凍保護(hù)劑。惟若要立即去除,則將解凍之細(xì)胞懸浮液加入含有5-10m1培養(yǎng)基之離心管內(nèi),離心 1000rpm,200-074-400凍存袋多少錢,5分鐘,移去上清液,加入新鮮培養(yǎng)基,混合均勻,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
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