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服務(wù)項(xiàng)目說明
客戶要求加可***marker的,需事先說明,并按照可***項(xiàng)目收費(fèi)
1、提供的蛋白量與目的待檢測的蛋白數(shù)量有關(guān),蛋白數(shù)量增加相應(yīng)的樣品量也要增加
2、胞漿、胞核蛋白抽提樣品來源為:哺乳動物細(xì)胞、動物***。如果1個(gè)樣品分別提取胞漿、胞核蛋白后,蛋白定量時(shí)以2個(gè)樣品計(jì)算
3、每張膜樣品數(shù)量為1-8個(gè),不足8個(gè)以8個(gè)收取。9-16個(gè)樣品為2張膜,17-24個(gè)樣品為3張膜;以此類推
舉例:7個(gè)樣品,1個(gè)目的蛋白,算1張膜;有9個(gè)樣品,1個(gè)目的蛋白,算2張膜
7個(gè)樣品,2個(gè)目的蛋白,算2張膜,有9個(gè)樣品,2個(gè)目的蛋白,算4張膜
以上為一般算法。如果客戶樣品數(shù)量需要按照組別等來進(jìn)行上樣時(shí)需要重新確定每張膜的上樣量及膜的張數(shù)
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博奧龍公司主要產(chǎn)品有抗0體制備***產(chǎn)品、病毒包裝相關(guān)產(chǎn)品、2萬多種科研用抗原抗0體、1200多種二抗,涵蓋20多個(gè)物種和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等標(biāo)記二抗;品類齊全的內(nèi)參標(biāo)簽抗0體;另有WB、IHC、ELISA、細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)***及諸多特色產(chǎn)品和特色技術(shù)服務(wù)。
Actin即肌動蛋白,是細(xì)胞的一種重要骨架蛋白。同時(shí)Actin在細(xì)胞分泌、吞噬、locomotion、cyto***ic streaming和cytokinesis等過程中起重要作用。Actin在不同物種之間高度保守,以至于很難獲得較好的針對actin的抗血0清。Actin大致可分為六種,其中四種是不同肌肉***特異性的,包括α-skeletal muscle actin,α-cardiac muscle actin,α-***ooth muscle actin,和γ-***ooth muscle actin; 其余兩種廣泛分布于各種***中,包括β-actin(β-non-muscle)和γ-non-muscle actin。不同的actin之間同源性大于90%,但在N-terminal同源性僅50%-60%,因此N-terminal常被用作actin的抗原。
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取血:
免0疫一周后,可以耳動脈取血檢測抗0體效價(jià)。因?yàn)槠鸪鯉状蚊?疫產(chǎn)生的抗0體的效價(jià)比較低,頭兩次取血,夠檢測用即可。在三次免0疫后,可以獲得較高0效價(jià)的抗0體,每次取血量可以在40ml,不要取太多,否則會造成兔子貧0血。
前幾次取血用19號針頭對兔子進(jìn)行耳動脈取血,室溫過夜析出血0清。
***后一次取血可以采用頸動脈放血,具體操作如下:
1、家兔仰臥于兔架上固定頭部,用紗布固定四肢。頭部略放低以暴露頸部。剃毛并消毒皮膚。
2、沿頸部中線用***刀切開皮膚約10cm,分離皮下結(jié)締***,直至暴露出氣管兩側(cè)的胸鎖乳突肌(小心操作,如碰到小血管出血,可用止血鉗止血)。
3、用直頭止血鉗分離胸鎖乳突肌與氣管間的頸三角區(qū)疏松***,暴露出頸總動脈后用彎頭眼0科鑷使之游離,剝離***和結(jié)締***。
4、于動脈下套入兩根黑絲線,分別置于遠(yuǎn)心及近心端。結(jié)扎遠(yuǎn)心端的絲線。近心端的動脈用血管夾夾住。
5、用小拇指墊在血管下,用尖頭眼0科***剪在兩根絲線間的動脈璧上剪一小口(勿剪斷),插入塑料放血管。再將近心端的絲線結(jié)扎固定于放血管上,以防放血管滑脫。
6、松開止血鉗,使血液流入容器中。一般一只家兔可放血100-120ml。
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