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QuickAntibody的一個重要用途是可方便地用于制備小鼠多克0隆抗0體。常規(guī)多克0隆抗0體制備多使用兔子,不但免0疫針次多、抗原用量大和抗0體產(chǎn)生慢,而且由于技術(shù)要求較高而往往需要委
托專門單位制備。使用QuickAntibody免0疫佐劑,任何實驗動物人員均可方便快速地制備小鼠多克0隆抗0體,標(biāo)準(zhǔn)免0疫程序只需要簡單地免0疫5只小鼠,即可在五周后獲得1ml高質(zhì)量的小鼠多克0隆抗0體。(強(qiáng)烈推薦使用本佐劑制備小鼠多克0隆抗0體,1ml高質(zhì)量的小鼠多克0隆抗0體足以滿足絕大多數(shù)用戶的實驗需求,快速佐劑,包括用于酶聯(lián)免0疫、免0疫印跡、流式細(xì)胞、免0疫組化和免0疫沉淀等)。
QuickAntibody建議常溫運(yùn)輸,2~8oC保存,無菌取用,有效期18個月。
細(xì)胞融合
取已免0疫小鼠的脾0臟用不完全培養(yǎng)基制成細(xì)胞懸液,計數(shù)。收集選擇生長狀態(tài)良好的 SP2 /0 骨0髓瘤細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液,計數(shù)。將 SP2 /0 骨0髓瘤細(xì)胞與免0疫小鼠的脾細(xì)胞以 1∶ 10 在 50% 的 PEG1500 作用下融合[8]。加 HAT 選擇培養(yǎng)基重懸混勻后滴入到鋪有飼養(yǎng)層細(xì)胞的 3 塊 96 孔細(xì)胞培養(yǎng)板。放入37 ℃ ,含 5% 的 CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
抗果蠅 MRJ 蛋白單克0隆抗0體的制備和鑒定
摘要: 制備抗 果 蠅 MRJ 蛋白單克0隆抗0體可用于研究果蠅 mrj 的 生 物 學(xué) 功 能,使 用 IPTG 誘 導(dǎo) 重 組 質(zhì) 粒pET28a-mrj 在大腸桿0菌 Rosetta 中表達(dá),重組蛋白經(jīng)過 Ni-IDA 凝膠柱親和純化后免0疫 BALB/c 小鼠。然后取免0疫好的小鼠的脾0臟細(xì)胞與小鼠骨0髓瘤細(xì)胞 SP2 /0 融合,經(jīng)克0隆和篩選獲得了能分泌抗果蠅 MRJ 蛋白單克0隆抗0體的雜交瘤細(xì)胞株。腹0水制備后獲得單克0隆抗0體,通過 ELISA 和 Western Blot 對所獲得的抗0體進(jìn)行鑒定,結(jié)果表明所制備單克0隆抗0體能夠特異性結(jié)合于原核及真核細(xì)胞表達(dá)的 MRJ 蛋白,可用于研究 mrj ***的生物學(xué)功能。
關(guān)鍵詞: mrj; 細(xì)胞融合; 單克0隆抗0體
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