腹0水的純化

采集復(fù)水后，12 000 r/min 離心 15 min，去掉 沉淀等雜質(zhì)。往離心后的腹0水中加入等體積的 PBS，并添加***銨固體至 50% 飽和，靜置 2 h，12 000 r/min離心15 min，fu水制備，棄 上 清，用 PBS 重 新 溶 解 沉 淀，然 后 再次加入***銨固體至 45% 飽和，靜置兩個小時左右，12 000 r/min 離心 15 min 棄去上清，用少量 PBS 溶解沉淀，即得到較純的抗0體，對 PBS 透析除去***銨，透析時間為24 h，透析過程中更換透析液兩至三次。

QuickAntibody抗0體產(chǎn)生快，抗0體滴度高，抗0體親合力高。以標準免0疫程序為例，無論是用于單克0隆還是多克0隆抗0體制備，只需要在三周內(nèi)進行兩針免0疫，通常在第五周即可獲得ELISA滴

度（Cutoff值為0.1000）高達1:10000-1:10000000的高親合力抗0體水平。

QuickAntibody不***抗原天然構(gòu)象，從而易于篩選獲得針對構(gòu)象型抗原表位的單克0隆抗0體，這是弗氏佐劑所不具備的一個重要特點。

QuickAntibody是水溶性佐劑，使用時不需要弗氏佐劑的復(fù)雜乳化過程，抗原和佐劑只需簡單混合即可免0疫動物。

QuickAntibody使用肌肉免0疫途徑，與常規(guī)小鼠單克0隆抗0體制備過程中使用足墊或脾內(nèi)免0疫相比，極大方便了使用。

在McAb的研制過程中，動物免0疫是McAb制備過程中的關(guān)鍵步驟。但是傳統(tǒng)動物免0疫方式通常需要二個月左右，不但耗時長，而且抗原消耗的量大、對抗原純度要求高。本實驗試圖通過優(yōu)化傳統(tǒng)免0疫小鼠的方法，大大縮短動物免0疫時間并減少了抗原的消耗量，為進一步組裝患者腫0瘤***及血0清中AFP水平檢測的***盒打下良好的基礎(chǔ)，為臨床研究、腫0瘤的診治提供更為有效的工具。




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