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博奧龍公司主要產(chǎn)品有抗0體制備***產(chǎn)品、病毒包裝相關(guān)產(chǎn)品、2萬(wàn)多種科研用抗原抗0體、1200多種二抗,涵蓋20多個(gè)物種和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等標(biāo)記二抗;品類齊全的內(nèi)參標(biāo)簽抗0體;另有WB、IHC、ELISA、細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)***及諸多特色產(chǎn)品和特色技術(shù)服務(wù)。
多抗制備的概念:由多個(gè)B淋巴細(xì)胞克0隆所產(chǎn)生的,受到多種抗原決定簇刺激并可與多種抗原表位結(jié)合的抗0體。多抗制備主要包括以下幾個(gè)步驟:免0疫動(dòng)物、佐劑、免0疫原、免0疫、取血等。
多抗制備的制備步驟
一、器材
剪刀(剪兔毛用)一把、彎頭眼0科***鑷子(游離血管用)一把、直頭眼0科***剪(剪血管用)一把,***刀架,***刀片,注0射器(1ml、10ml,25ml)附針頭,兔子固定架,滅菌三角燒瓶(200ml)或平皿(直徑18cm)、彎頭止血鉗四把,直頭止血鉗兩把,***縫合線,塑料放血管,紗布等。
二、***
生理鹽水
弗氏完全佐劑
弗氏不完全佐劑
二甲0苯,酒精棉,脫脂棉,2% NaN3
三、免0疫原:蛋白或KLH偶聯(lián)的多肽。每次免0疫100-200μg免0疫原。
四、兔子的選擇
兔子的重量應(yīng)在四斤以上,兩耳光滑,明顯可見(jiàn)耳靜、動(dòng)脈,健康。
五、免0疫
用生理鹽水稀釋免0疫原,慢病毒,然后與相應(yīng)的佐劑進(jìn)行1:1混合??乖妥魟┩耆旌闲纬煞€(wěn)定的乳劑,將該乳劑在兔子雙肩周圍的皮膚下進(jìn)行皮下0注0射和后大腿進(jìn)行肌肉注0射。每個(gè)區(qū)域大約用1/4的免0疫原。這樣免0疫原可以持久存在從而提高免0疫應(yīng)答。
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抗0體是具有4條多肽鏈的對(duì)稱結(jié)構(gòu),其中2條較長(zhǎng)、相對(duì)分子量較大的相同的重鏈(H鏈);2條較短、相對(duì)分子量較小的相同的輕鏈(L鏈)。鏈間由二硫鍵和非共價(jià)鍵聯(lián)結(jié)形成一個(gè)由4條多肽鏈構(gòu)成的單體分子。輕鏈有κ和λ兩種,重鏈有μ、δ、γ、ε和α五種。 整個(gè)抗0體分子可分為恒定區(qū)和可變區(qū)兩部分。在給定的物種中,不同抗0體分子的恒定區(qū)都具有相同的或幾乎相同的氨基酸序列。
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不同亞型的抗0體在結(jié)構(gòu)上有所區(qū)別,其免0疫源性與在體內(nèi)發(fā)揮的作用存在差異,對(duì)抗0體進(jìn)行進(jìn)一步的細(xì)分,并進(jìn)行抗0體亞型鑒定,對(duì)于***作用機(jī)理的研究、抗0體藥0物的開(kāi)發(fā)有重要意義。那么什么是抗0體亞型鑒定?眾所周知,亞型指的是相同的構(gòu)成方式,但是空間結(jié)構(gòu)不同的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)???體亞型,指的是在機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生的“Y”構(gòu)型的免0疫球蛋白(Ig),基于小分子多肽結(jié)構(gòu)上的差異,可以進(jìn)一步的進(jìn)行細(xì)分。相關(guān)抗0體亞型鑒定有:IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3,IgM,IgA 的鑒定。
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