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博奧龍公司主要產(chǎn)品有抗0體制備***產(chǎn)品、病毒包裝相關(guān)產(chǎn)品、2萬多種科研用抗原抗0體、1200多種二抗，涵蓋20多個物種和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等標記二抗；品類齊全的內(nèi)參標簽抗0體；另有WB、IHC、ELISA、細胞培養(yǎng)相關(guān)***及諸多特色產(chǎn)品和特色技術(shù)服務(wù)。

甲胎蛋白(AFP)是一種胎兒特異性糖蛋白，無縫kelong（***盒），分子量約70，000～72，000道爾頓^，在胚胎肝0臟和卵黃囊中合成，正常人血中含量甚微。1972年有人首0次報道開放性神0經(jīng)管畸形胎兒、羊水中有高水平的AFP。若胎兒羊水中AFI’值高于均值常見于患無腦兒或脊柱裂的胎兒，亦見于其他多種畸形，如先天0性shen病、食道或腸閉鎖、囊0性水瘤、骶尾部畸胎瘤、Rh血型不和、先天愚型、先0天性性腺發(fā)育不全等∽J。1983年發(fā)現(xiàn)母體血0清AFP水平的降低與唐氏***有密切關(guān)系一。。因此制備高0效特異的AFP單克抗0體(McAb)具有重要的意義。

***與儀器

試 劑: pET28a-mrj 轉(zhuǎn) Rosetta 菌 0種 由 本 實 驗 室 所保存。免0疫佐劑 quickantibody 購自北京康碧泉公司;HAT 選擇性培養(yǎng)基、HT 培養(yǎng)基、8-Azaguanine 和融合*** 50% PEG 購自美國 Sigma 公司; 胎牛血0清及 PRMI 1640 培 養(yǎng) 基 為 Hyclone 產(chǎn) 品; 辣 根 過 氧 化 物 酶( HRP) 標記山羊抗小鼠 IgG ; 8 周齡雌性健康 BALB / c 小鼠，本實驗室飼養(yǎng); 小鼠骨0髓瘤細胞 SP2 /0 由南京大學(xué)贈送，融合前兩星期復(fù)蘇并經(jīng) 8-Azaguanine篩選; 其他***均為國產(chǎn)分析分析純。

儀器: 二 氧 化 碳 培 養(yǎng) 箱( Thermo) ; 倒 置 顯 微 鏡( Olympus) ; 細胞培養(yǎng)耗材，96 孔板、24 孔板、6 孔細胞培養(yǎng)板、移液***( Corning) ; 1 mL 的 A 蛋白層析柱

材料與方法

一、材料

AFP購自上海領(lǐng)潮公司。SP2／0骨0髓瘤細胞(中科院上海細胞庫)。8～12周齡Balb／c小鼠(第四軍0醫(yī)大學(xué)實驗動物中心)。SPF級。

二、方法

1．動物免0疫：將4只8～12周齡Balb／c小鼠隨機分為兩組，每組2只，分別命名為1號和2號(第yi組)、3號和4號(第二組)。第yi組按常規(guī)免0疫方法進行免0疫一…，第二組采用改良的免0疫方法進行免0疫。免0疫前靜脈采集少量血液，析出血0清作為后續(xù)檢測的陰性對照血0清。

第yi組：AFP50ug(50肚1)與等量福氏完全佐劑(Sigma，美國)混合，充分乳化后注入8～12周齡Balb／c小鼠腹腔，2周后用同量抗原加不完全福氏佐劑(Sigma，美國)腹腔***，4周后用同量抗原加不完全福氏佐劑腹腔***，融合前3 d作腹腔***加強免0疫。

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