動物免0疫
使用 quickantibody 作為免0疫佐劑,對小鼠腿部肌肉***免0疫,MRJ 重組蛋白( 1 μg /mL) 與免0疫佐劑各200 μL 混勻免0疫 6-8 周齡 BALB / c 小鼠 4 只,弗氏不完全佐劑的成分,每只*** 100 μL。初次免0疫后第 21 天同樣的方法進行第二次免0疫,第 35 天尾靜脈取少量血做效價檢測,間接 ELISA 檢測效價滴度高于 1 ∶ 8 000 則進行沖擊免0疫,沖擊免0疫直接以不加佐劑的 MRJ 蛋白對小鼠沖擊免0疫一次,每只 20 μg。沖擊免0疫后 96 h 內(nèi)取脾0臟細胞做細胞融合。
作用機制:
佐劑增強免0疫應(yīng)答的機制可能有:①改變抗原物理性狀,延長抗原在機體內(nèi)的存在時間和保持對免0疫系統(tǒng)的持續(xù)激0活作用,佐劑中的礦物油成分主要起緩釋作用,有利于抗原在體內(nèi)緩慢釋放,延緩抗原在體內(nèi)降解,從而更有效地刺激免0疫系統(tǒng)。②使抗原易被巨噬細胞吞噬,刺激單核巨噬細胞系統(tǒng),增強其對抗原的處理和呈遞抗原的能力。③促進淋巴細胞的增殖、分化,從而擴大和增強機體的免0疫應(yīng)答的效應(yīng)。
QuickAntibody抗0體產(chǎn)生快,抗0體滴度高,抗0體親合力高。以標準免0疫程序為例,無論是用于單克0隆還是多克0隆抗0體制備,只需要在三周內(nèi)進行兩針免0疫,通常在第五周即可獲得ELISA滴
度(Cutoff值為0.1000)高達1:10000-1:10000000的高親合力抗0體水平。
QuickAntibody不***抗原天然構(gòu)象,從而易于篩選獲得針對構(gòu)象型抗原表位的單克0隆抗0體,這是弗氏佐劑所不具備的一個重要特點。
QuickAntibody是水溶性佐劑,使用時不需要弗氏佐劑的復雜乳化過程,抗原和佐劑只需簡單混合即可免0疫動物。
QuickAntibody使用肌肉免0疫途徑,與常規(guī)小鼠單克0隆抗0體制備過程中使用足墊或脾內(nèi)免0疫相比,極大方便了使用。
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