動(dòng)物有上百萬(wàn)種不同的B淋巴細(xì)胞系,具有不同***的B淋巴細(xì)胞合成不同的***。當(dāng)機(jī)體受抗原刺激時(shí),抗原分子上的許多決定簇分別各個(gè)具有不同***的B細(xì)胞。被的B細(xì)胞分裂增殖形成效應(yīng)B細(xì)胞和記憶B細(xì)胞,大量的漿細(xì)胞合成和分泌大量的***分子分布到血液、體液中。
如果能選出一個(gè)制造一種專一***的漿細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),就可得到由單細(xì)胞經(jīng)分裂增殖而形成細(xì)胞群,PIK3CA(E542Q)***,即單。單細(xì)胞將合成針對(duì)一種抗原決定簇的***,稱為單***。
突變的流程
1. 在dam+ 陽(yáng)性的宿主菌E. coli.增殖獲得化的模板DNA
2. 設(shè)計(jì)2條互補(bǔ)匹配的、突變位點(diǎn)居***的突變引物
3. 加入反應(yīng)組分如buffer、 temte、dNTP、complementary mutagenic primers、QuikSolution&QuikChange Lightning Enzyme
4. 運(yùn)行反應(yīng)
5. Dpn I 消化化的模板
6. 轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞、鋪板篩選
7. 提取 DNA、測(cè)序鑒定
體外突變技術(shù)是研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能之間的復(fù)雜關(guān)系的有力工具,也是實(shí)驗(yàn)室中改造/優(yōu)化***常用的手段。蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)決定其功能,二者之間的關(guān)系是蛋白質(zhì)組研究的***之一。對(duì)某個(gè)已知***的特定堿基進(jìn)行改變、缺失或者插入,可以改變對(duì)應(yīng)的氨基酸序列和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),對(duì)突變***的表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行研究有助于人類了解蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系,探討蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)/結(jié)構(gòu)域。
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