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DOI:搭建信息資源的橋梁
數(shù)字對象唯0一標識(digital object identifier,DOI)被形象地稱為“英特網(wǎng)上的條形碼”,如同貼了標簽的商品,數(shù)字對象一旦被分配一個DOI號,無論它處于英特網(wǎng)上的任何位置,通過DOI都能夠找到它,因此解決了傳統(tǒng)網(wǎng)絡標識系統(tǒng)的不穩(wěn)定性,實現(xiàn)了更有效的網(wǎng)絡鏈接。DOI技術即將成為國際上數(shù)字出版界構建數(shù)字信息交換平臺的首要選擇。
腹0水的純化
采集復水后,12 000 r/min 離心 15 min,去掉 沉淀等雜質。往離心后的腹0水中加入等體積的 PBS,并添加***銨固體至 50% 飽和,靜置 2 h,12 000 r/min離心15 min,棄 上 清,轉染***盒,用 PBS 重 新 溶 解 沉 淀,然 后 再次加入***銨固體至 45% 飽和,靜置兩個小時左右,12 000 r/min 離心 15 min 棄去上清,用少量 PBS 溶解沉淀,即得到較純的抗0體,對 PBS 透析除去***銨,透析時間為24 h,透析過程中更換透析液兩至三次。
1. 9 腹0水效價的測定
1 mg /mL 的 MRJ 原核表達白每孔 100 μL,包被Elisa 酶標板過夜,以 SP2 /0 細胞培養(yǎng)上清為陰性對照,用間接 Elisa 方法檢測腹0水的效價。同時 WesternBlot 檢測抗0體使用于 Western Blot 的效價,用 MRJ 重組蛋白做 抗 原 進 行 SDS-PAGE 電 泳,用 制 備 的 MRJ單克0隆 抗0體 作 為 一 抗,設置抗0體稀釋濃度 分別為1∶ 500; 1 ∶ 1 000; 1 ∶ 2 000; 1 ∶ 3 000; 1 ∶ 5 000。進 行Western Blot 檢測。
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