操作步驟
石蠟切片
1. 脫蠟：二甲0苯，室溫，2 次，每次 5～10min。
2. 水合 100%、100%、95%、90%、80%、70%乙醇、蒸餾水，每級 3min。
3. 在洗滌緩沖液中潤洗 10min。
4. 如有必要，封閉內(nèi)源性過氧化物酶（含 0.3% H2O2 無水甲0醇）
5. 繼續(xù)通用步驟。
冰凍切片
1. 空氣中干燥切片，至少 1hr
2. 用前用合適的固定液固定，如果要延長保存時間，固定后在空氣中干燥 1hr。 單獨包裝在鋁箔袋中，–70°C 干燥保存，cAMP elisa ***盒，用前從冰箱取出，室溫放置至少 1hr。
3. 浸入洗滌緩沖液中 10～15min。
4. 如有必要，封閉內(nèi)源性過氧化物酶（含 0.3% H2O2 無水甲0醇）。
5. 繼續(xù)通用步驟。
注：對于靈敏度要求不是極高的普通實驗室的染膠實驗，一般染色10-20分鐘（可以將100ng含量以上的蛋白染出條帶），低背景，無需脫色，直接觀察或者拍照；
對于靈敏度要求極高的染膠實驗，一般可采用染色1-2小時（可以將10ng含量蛋白染出條帶），低背景，無需脫色，直接觀察或者拍照；
一般染色2小時后，蛋***帶基本不會再加深，而背景會繼續(xù)加深，所以一般建議染色不要超過2小時。
Multi-tag多表位標(biāo)簽蛋白
Multi-tag多表位標(biāo)簽蛋白是通過大腸桿0菌表達(dá)的已知抗原表位標(biāo)簽的融合蛋白，用于Western Blot陽性對照。融合蛋白中含有***i-tag、Calmodulin-tag、polyglutamate-tag、E-tag、3×FLAG-tag（FLAG-tag包含在其中）、HA-tag、His-Tag、Myc-tag、S-tag、SBP-tag、Softag 1-tag、Softag 3-tag、Strep-tag、TC tag、V5-tag、T7-tag、VSV-tag、Xpress-tag、Isopep-tag、Spy-tag、Snoop-tag、Trx-tag等22種抗原標(biāo)簽序列。純化后的融合蛋白可與各種蛋白標(biāo)簽抗0體發(fā)生特異性反應(yīng)。
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