凍存細(xì)胞復(fù)蘇步驟

1. 從冰箱中取出凍存的細(xì)胞，立即放入37℃水浴槽中快速解凍。

2. 待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后，將其中的混合液移至離心管中，1000rmp，5分鐘離心收集凍存細(xì)胞沉淀，移去上清液（操作時(shí) 小心，切勿將細(xì)胞沉淀移去）。

3. 加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩加入到細(xì)胞沉淀，輕柔地混勻，將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)容器中。

4. 鏡檢細(xì)胞后，細(xì)胞凍存液，可根據(jù)各自研究的需要和方法經(jīng)行細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)。

無(wú)血0清細(xì)胞凍存液，通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株（腫0瘤細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞），凍存細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存（>5年）。CELLS***ING配方成分明確，不含動(dòng)物來(lái)源性蛋白，不含血0清，可減少各類***、病毒和支原體等污染，保證凍存細(xì)胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分，提高細(xì)胞存活率和活力，亦適合于無(wú)血0清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。

細(xì)胞凍存步驟

1. 常規(guī)方法收集對(duì)數(shù)期的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞于試管中。

2. 根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存細(xì)胞數(shù)。

3. 將所需數(shù)目的細(xì)胞懸浮液置于離心管中，1000rmp，5分鐘離心收集培養(yǎng)細(xì)胞沉淀，徹0底棄去離心管中的上清液。

4. 加入適量的CELLS***ING?細(xì)胞凍存液于離心管中，使細(xì)胞濃度約為5×105-1×107/ml。輕柔地混勻細(xì)胞，制成細(xì)胞混合液。

5. 將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)記的凍存管中，建議每管1ml或1.5ml。

6. 直接將分裝好的細(xì)胞凍存管放入-80℃超低溫冰箱中，可長(zhǎng)期冷凍保存。

7. 如果想液氮中長(zhǎng)期保存，需先放入-80℃冰箱至少一天時(shí)間，方可移至液氮罐中保存。

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