過(guò)度染色
1. 沒(méi)有有效封閉內(nèi)源性過(guò)氧化物酶。
2. 不完全脫蠟。
3. 過(guò)度***粘附。
4. 一抗稀釋度不當(dāng)。
5. 蛋白質(zhì)非特異性結(jié)合。
不染色
1. 忘記加一抗、生物素化二抗或親合素-HRP。
2. 處理過(guò)程中抗原***。
3. 固定不當(dāng)。
4. 用含疊氮鈉洗滌液。
5. 操作過(guò)程中樣品徹0底干燥。
6. 未按操作程序操作。
染色較弱
1. 加免0疫***前沒(méi)有將洗滌液去掉。
2. 抗0體稀釋不當(dāng)。
3. 顯色前底物放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。
4. 過(guò)氧0化氫的***作用。
蘇0木素為堿性天然染料,可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA,在DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇0木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇0木素在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。 用于細(xì)胞學(xué)染色和免0疫組化(IHC)復(fù)染。
1.在用 ALP 的 IHC 中,單抗制備,內(nèi)源性堿性磷酸酶常使靶抗原的特異性染色分辨不清。本品***細(xì)胞制片、冰凍***切片和石蠟包埋切片中的內(nèi)源性堿性磷酸酶。
2.冰凍***切片和細(xì)胞制片如外周血、骨0髓和其它體液包含大量造血干細(xì)0胞。對(duì)于冰凍***切片,建議用丙0酮固定。對(duì)于血細(xì)胞和骨0髓涂片,建議用丙0酮/甲0醇固定。
3.標(biāo)本的染色依賴于染色前的***處理。不恰當(dāng)?shù)墓潭?、冷凍、融化、洗滌、干燥、加熱和切片可能產(chǎn)生假陽(yáng)性。假陽(yáng)性結(jié)果也可能由壞死和變性的細(xì)胞產(chǎn)生的交叉反應(yīng)。
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