注意事項：

1. 質(zhì)粒 DNA：請用能夠去除內(nèi)毒0素的方法制備高質(zhì)量的質(zhì)粒 DNA。

2. 稀釋液：0.85%（W/V）生理鹽水，用低內(nèi)毒0素純水配制，高壓消毒或除0菌過濾。

3. 培養(yǎng)基：經(jīng)過 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常規(guī)培養(yǎng)基測試，推薦使用含 5~10%牛血0清的

DMEM，若轉(zhuǎn)染效果不理想可嘗試其它培養(yǎng)基。

4. 以 24 孔細(xì)胞板轉(zhuǎn)染實驗為例，推薦每孔低內(nèi)毒0素質(zhì)粒 DNA 用量為 2μg、轉(zhuǎn)染***用量為 3~5μl，請

在正式實驗前根據(jù)不同細(xì)胞和不同培養(yǎng)基用報告***進(jìn)行優(yōu)化。

5. 如果實驗?zāi)康脑谟诤Y選抗藥性穩(wěn)定細(xì)胞系，可在細(xì)胞傳代后尚未貼壁時直接進(jìn)行轉(zhuǎn)染，從而可節(jié)省

18~24 小時的轉(zhuǎn)染前細(xì)胞培養(yǎng)時間。

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博奧龍公司主要產(chǎn)品有抗0體制備***產(chǎn)品、病毒包裝相關(guān)產(chǎn)品、2萬多種科研用抗原抗0體、1200多種二抗，涵蓋20多個物種和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等標(biāo)記二抗；品類齊全的內(nèi)參標(biāo)簽抗0體；另有WB、IHC、ELISA、細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)***及諸多特色產(chǎn)品和特色技術(shù)服務(wù)。

使用方法

1. 將新鮮消化的 BHK-21 細(xì)胞接種到 24 孔細(xì)胞板中，每孔 1~2×105細(xì)胞，pei轉(zhuǎn)染***，1ml 完全培養(yǎng)基。備注：可在生長旺盛的細(xì)胞傳代后直接按下述步驟 2~5 進(jìn)行轉(zhuǎn)染，無需 18~24 小時的等候時間。

2. 將 2μg 質(zhì)粒 DNA 和 3~5μl 轉(zhuǎn)染***分別稀釋到 50μl 生理鹽水中。備注：質(zhì)粒 DNA 和轉(zhuǎn)染***的***適用量需要根據(jù)不同培養(yǎng)基來優(yōu)化，但理論上不超出 1~2μg 和 3~5μl 范圍。

3. 合并上述兩溶液并混勻。備注：無需其它轉(zhuǎn)染***所需的 10~30 分鐘的等候時間。

4. 將上述復(fù)合物直接加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中，用加樣器吸打混勻。備注：轉(zhuǎn)染復(fù)合物可直接加入含血0清的細(xì)胞培養(yǎng)基中進(jìn)行轉(zhuǎn)染。

5. 將細(xì)胞板移至 37oC/5% CO2 孵箱中進(jìn)行培養(yǎng)。備注：無需在轉(zhuǎn)染后 4~6 小時補加血0清或更換培養(yǎng)基。

6. 24~72 小時后根據(jù)實驗需要進(jìn)行瞬時表達(dá)分析或穩(wěn)定細(xì)胞系加壓篩選。

北京博奧龍免0疫技術(shù)有限公司是一家由留學(xué)歸國人員創(chuàng)辦的生命科學(xué)領(lǐng)域高新技術(shù)企業(yè)，專0業(yè)從事新型生化***的研發(fā)和銷售。公司理念是通過自主創(chuàng)新的品牌產(chǎn)品改變傳統(tǒng)實驗?zāi)Ｊ?，使生命科學(xué)研究變得更輕松、更高0效。公司成立八年多來推出了上萬種自主品牌產(chǎn)品，其中包括QuickAntibody?免0疫佐劑、QuickShuttle?轉(zhuǎn)染***、QuickFreezing?細(xì)胞凍存液、QuickVerification?膠體金檢測卡、Hybridoma Feeder添加因子和Pan-HPV? HPV L1抗0體等多種獨0特的自主知識產(chǎn)權(quán)產(chǎn)品。秉承“專0業(yè)、創(chuàng)新”的理念，公司將繼續(xù)在擅長專0業(yè)領(lǐng)域做強(qiáng)做大，為客戶提供更多的創(chuàng)新0產(chǎn)品和服務(wù)，力爭成為國際知0名的品牌生化***公司。




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