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博奧龍公司主要產(chǎn)品有抗0體制備***產(chǎn)品、病毒包裝相關(guān)產(chǎn)品、2萬多種科研用抗原抗0體、1200多種二抗,涵蓋20多個(gè)物種和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等標(biāo)記二抗;品類齊全的內(nèi)參標(biāo)簽抗0體;另有WB、IHC、ELISA、細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)***及諸多特色產(chǎn)品和特色技術(shù)服務(wù)。
單克0隆抗0體(單抗制備)制備過程有以下幾個(gè)步驟:
步驟一:細(xì)胞免0疫
免0疫動(dòng)物免0疫動(dòng)物是用目的抗原免0疫小鼠,使小鼠產(chǎn)生致敏B淋巴細(xì)胞的過程。 一般選用6-8周齡雌性Balb/c小鼠,按照預(yù)先制定的免0疫方案進(jìn)行免0疫注0射。 抗原通過血液循環(huán)或淋巴循環(huán)進(jìn)入外周免0疫器0官,刺激相應(yīng)B淋巴細(xì)胞克0隆,使其活化、增殖,并分化成為致敏B淋巴細(xì)胞。
步驟二:細(xì)胞融合
采用眼球摘除放血法處死小鼠,慢病毒包裝,無菌操作取出脾0臟,在平皿內(nèi)擠壓研磨,制備脾細(xì)胞懸液。 將準(zhǔn)備好的同系骨0髓瘤細(xì)胞與小鼠脾細(xì)胞按一定比例混合,并加入促融合劑聚乙 二醇。在聚乙 二醇作用下,各種淋巴細(xì)胞可與骨0髓瘤細(xì)胞發(fā)生融合,形成雜交瘤細(xì)胞。
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水佐劑免0疫步驟
步驟一:用生理鹽水將抗原稀釋到2倍***終濃度。備注:推薦使用的抗原用量為(1)免0疫原性較弱的亞單位蛋白每針次1~50μg(通常為10~20μg);(2)免0疫原性較強(qiáng)的滅活全病毒和病毒樣顆粒每針次0.1~10μg(通常為1~2μg)。
步驟二:充分混勻佐劑,無菌條件下取出所需量與抗原按體積比1:1迅速混勻。備注:本佐劑產(chǎn)生沉淀屬正?,F(xiàn)象,與抗原混合操作越快越好。
步驟三:通過后腿小腿肌肉注0射免0疫小鼠,每只小鼠100μl。備注:本佐劑與抗原混合后產(chǎn)生沉淀屬正?,F(xiàn)象,抽入針管前應(yīng)充分混勻,抽入針管后應(yīng)盡快注0射。
步驟四:第21天按同樣方式加強(qiáng)免0疫一針。備注:每次佐劑和抗原現(xiàn)配現(xiàn)用。
步驟五、第35天采微量尾血進(jìn)行ELISA測(cè)定,抗0體滴度應(yīng)在1:10000~1:10000000 范圍內(nèi), 隨后即可摘眼球采全血或進(jìn)行脾細(xì)胞融合。備注:若極偶爾情況下抗0體滴度達(dá)不到實(shí)驗(yàn)需求,可在第42天再按同樣方式加強(qiáng)免0疫一針。
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蛋白染色液查看 BF06085抗0體稀釋液 抗0體稀釋液查看 BTYA0330考馬斯亮藍(lán)脫色液 考馬斯亮藍(lán)查看 BTYA0306SDS-PAGE凝膠制備***盒6%50T320蛋白電泳查看 BF06084生物素-酪胺信號(hào)放大***盒(HRP底物)500T620酪胺信號(hào)放大***(盒)查看 BF06182FITC-酪胺信號(hào)放大***盒ELISA:500T/IHC:100T620酪胺信號(hào)放大***(盒)查看 BF06144預(yù)裝脫鹽柱(重力/離心) 脫鹽柱查看 BF06145預(yù)裝脫鹽柱(重力/離心) 脫鹽柱查看 BF06144預(yù)裝脫鹽柱(重力/離心) 預(yù)裝脫鹽柱查看 BF06145預(yù)裝脫鹽柱(重力/離心) 預(yù)裝脫鹽柱查看 BF06007-1000ml可溶型TMB單組份(HRP底物) TMB查看 BF06124-2ELISA通用***盒(HRP標(biāo)記抗小鼠,TMB顯色反應(yīng)) TMB查看 BF06126-1ELISA通用***盒(生物素標(biāo)記抗兔,HRP標(biāo)記親和素,TMB顯色反應(yīng)) TMB查看 BTYA0105Elisa專0用-TMB單組分 TMB查看
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