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博奧龍公司主要產(chǎn)品有抗0體制備***產(chǎn)品、病毒包裝相關(guān)產(chǎn)品、2萬(wàn)多種科研用抗原抗0體、1200多種二抗,涵蓋20多個(gè)物種和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等標(biāo)記二抗;品類齊全的內(nèi)參標(biāo)簽抗0體;另有WB、IHC、ELISA、細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)***及諸多特色產(chǎn)品和特色技術(shù)服務(wù)。
抗0體稀釋液,即用于稀釋抗0體的溶液。在抗原抗0體反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)中,需用已經(jīng)制備的抗0體檢測(cè)樣本中的抗原,但抗0體***的濃度很高,需要稀釋合適的倍數(shù)后才可以用于檢測(cè)抗原。
脫脂奶粉
脫脂奶粉容易發(fā)霉變質(zhì),不利于抗0體的回收和保存;國(guó)產(chǎn)milk脫脂不充分會(huì)增加背景、拮抗抗原抗0體結(jié)合,且不能用來(lái)做磷酸化蛋白;不能用于稀釋二抗。
通用步驟
加血0清封閉液
1. 去掉片子上多余緩沖液。
2. 取適量血0清封閉液完全覆蓋切片。
3. 在濕盒中室溫孵育 15min。
4. 浸入洗滌緩沖液中 5min。
加一抗
1. 去掉切片上的多余洗滌緩沖液。
2. 將稀釋的一抗加到切片上,完全覆蓋***細(xì)胞。
3. 在濕盒中室溫孵育 30min。
4. 用洗滌緩沖液洗去一抗,單抗(的)制備,在洗液中潤(rùn)洗 5min。
注:如果顯色速度過(guò)快,建議進(jìn)一步稀釋一抗,將一抗稀釋度以 1/50、1/100、1/200、1/400 和 1/800,***佳稀釋度的選擇是顯色 10min 后陽(yáng)性顯色效果滿意而沒(méi)有背景顯色。
過(guò)度染色
1. 沒(méi)有有效封閉內(nèi)源性過(guò)氧化物酶。
2. 不完全脫蠟。
3. 過(guò)度***粘附。
4. 一抗稀釋度不當(dāng)。
5. 蛋白質(zhì)非特異性結(jié)合。
不染色
1. 忘記加一抗、生物素化二抗或親合素-HRP。
2. 處理過(guò)程中抗原***。
3. 固定不當(dāng)。
4. 用含疊氮鈉洗滌液。
5. 操作過(guò)程中樣品徹0底干燥。
6. 未按操作程序操作。
染色較弱
1. 加免0疫***前沒(méi)有將洗滌液去掉。
2. 抗0體稀釋不當(dāng)。
3. 顯色前底物放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。
4. 過(guò)氧0化氫的***作用。
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