其他問題
1. 條帶連成一片。多數(shù)原因是上樣量過多,其次是樣品彌散或中途停止了電泳;
2. 條帶偏高或者偏低。常有可能是蛋白有修飾現(xiàn)象;還有可能是膠的濃度與目的蛋白的濃度不對(duì)應(yīng),例如說100KD以上的蛋白用的12%膠跑,或者說20KD的蛋白用的6%膠跑;再是蛋白有降解,會(huì)在比原來位置低的地方出現(xiàn)主帶,跟著出現(xiàn)一些其他條帶,明顯現(xiàn)象是所有的條帶比正常的都低,且條帶模糊不清晰。
空白片
1. 原因:比較多,***可能是一抗加錯(cuò)了,或者稀釋時(shí)沒取到亦或原管***沒有混勻,再有可能二抗種屬加錯(cuò)了,例如常見是兔的加成鼠的;轉(zhuǎn)膜電壓電流時(shí)間等;
2. 優(yōu)化:仔細(xì)檢查***是否加錯(cuò),核實(shí)轉(zhuǎn)膜設(shè)置沒有問題;
3. 解析:膠片上一點(diǎn)信號(hào)都沒有,多數(shù)情況是***加錯(cuò)了;如果中間出現(xiàn)了微弱的條帶,Mlkl兔多抗,可能原因是蛋白上樣量太少,一抗?jié)舛冗^低,ECL發(fā)光液稀釋過高或失效。若轉(zhuǎn)膜出現(xiàn)了失誤,比如膜放反了,肯定白片。
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Polo樣激酶1(Plk1)磷酸化DAZ相互作用蛋白1(Dzip1)在細(xì)胞周期中調(diào)節(jié)BBSome蛋白的中心衛(wèi)0星***。
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