另外粒徑大小一致,可以保持分子在填料微球的擴(kuò)散遷移路徑基本保持一致,相應(yīng)的保留時(shí)間也一致,減少分子擴(kuò)散系數(shù),從而獲得更高的柱效。因此高度粒徑均一的單分散色譜填料既可以降低渦流擴(kuò)散系數(shù)又可以減少分子擴(kuò)散系數(shù),有機(jī)雜化硅膠,從而提高柱效。另外粒徑越精l確、分布越窄、其柱床越穩(wěn)定、反壓越低、批與批的重復(fù)性越好,越能滿足高l性能色譜分析檢測(cè)的需求。第二代多孔球型色譜填料一般是由溶膠一凝膠法 (Sol-Gel) 或是噴霧干燥法制備。這兩種方法制備的球形硅膠粒徑分布都較寬不能直接用作色譜填料,而需要經(jīng)過(guò)復(fù)雜篩分分級(jí)處理去除過(guò)大或過(guò)小的硅膠微球以滿足色譜填料的需求,因此生產(chǎn)周期長(zhǎng)、產(chǎn)率低、批與批的重復(fù)性差,且會(huì)產(chǎn)生大量的不合格的產(chǎn)品。而且填料的顆粒越細(xì)篩分工藝越困難、篩分設(shè)備也越貴。其實(shí),超大孔結(jié)構(gòu)硅膠,即使經(jīng)過(guò)篩分,其填料粒徑分布也較寬。因此如何直接制備精l確的粒徑大小和高度的粒徑均一性單分散多孔硅膠一直是該領(lǐng)域的技術(shù)難題和發(fā)展方向。
高l效液相色譜(HPLC) 是20 世紀(jì) 70 年***展起來(lái)的可以對(duì)多組分復(fù)雜樣品進(jìn)行高l效、快速的分離分析技術(shù)。伴隨著色譜理論體系不斷完善,色譜柱種類日益豐富,新型色譜填料不斷開(kāi)發(fā)成功,新的分離模式和分離方法的建立,色譜儀器性能不斷改進(jìn)和更新,液相色譜分析技術(shù)已成為藥l物分析、食品檢測(cè)、環(huán)境監(jiān)測(cè)、石油化工、生命科學(xué)等不可或缺的工具。色譜柱是液相色譜系統(tǒng)的心臟,硅膠,色譜填料是色譜柱,因此色譜柱和色譜填料被譽(yù)為色譜“芯”。開(kāi)發(fā)新型高l性能色譜填料以滿足越來(lái)越復(fù)雜樣品高l效、快速分離分析的需求一直是業(yè)界的追求目標(biāo)。隨著生命科學(xué)、環(huán)境科學(xué)、制藥、及合成化學(xué)的迅猛發(fā)展, 人們對(duì)HPLC 性能不斷提出更高、更新的要求。提高色譜填料的柱效、選擇性、峰容量和使用穩(wěn)定性, 增大填料的pH 使用范圍、延長(zhǎng)填料使用壽命,單分散球型硅膠, 具有多種分離模式以及對(duì)環(huán)境友好已經(jīng)成為色譜填料的發(fā)展方向。
SEC色譜填料SEC色譜分離模式與其它所有分離模式很大的不同就是樣品分子與固定相表面配基之間不存在相互作用。SEC 對(duì)樣品組分分離只取決于填料的孔徑大小與被分離組分分子尺寸之間的關(guān)系,與流動(dòng)相的性質(zhì)沒(méi)有直接的關(guān)系。不同大小的溶質(zhì)分子可以通過(guò)擴(kuò)散遷移和滲透到不同大小的孔洞里。小分子,可以進(jìn)入更多更深的孔道里,因此小分子駐保留時(shí)間長(zhǎng),洗脫體積大,而大分子會(huì)被小孔排阻在外,只能進(jìn)入大孔孔洞中,因此其經(jīng)過(guò)柱床的路徑比較短,會(huì)先從柱子中洗脫出來(lái),從而實(shí)現(xiàn)具有不同分子大小樣品的分離。
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