




SEC色譜填料SEC色譜分離模式與其它所有分離模式很大的不同就是樣品分子與固定相表面配基之間不存在相互作用。SEC 對樣品組分分離只取決于填料的孔徑大小與被分離組分分子尺寸之間的關(guān)系,與流動相的性質(zhì)沒有直接的關(guān)系。不同大小的溶質(zhì)分子可以通過擴(kuò)散遷移和滲透到不同大小的孔洞里。小分子,可以進(jìn)入更多更深的孔道里,UPLC,因此小分子駐保留時(shí)間長,洗脫體積大,而大分子會被小孔排阻在外,只能進(jìn)入大孔孔洞中,因此其經(jīng)過柱床的路徑比較短,單分散球型硅膠,會先從柱子中洗脫出來,從而實(shí)現(xiàn)具有不同分子大小樣品的分離。
其它色譜填料除了反相、正相、HILIC、手性及SEC外,硅膠還用于離子交換、疏水及親和色譜分離和分析。但由于離子交換、疏水及親和色譜填料主要用于生物分離分析,因此具有化學(xué)穩(wěn)定性好,硅膠,耐酸堿性寬的聚l色譜填料更具有優(yōu)勢。目前市場上離子交換、疏水及親和色譜填料基本上都是基于高交聯(lián)度的多孔或無孔聚l色譜填料。硅膠色譜柱填料作為HPLC的,一直是色譜研究中關(guān)鍵的部分. 提高色譜填料的柱效、選擇性、峰容量和使用穩(wěn)定性, 增大填料的pH 使用范圍、延長填料使用壽命, 具有多種分離模式將成為色譜填料的發(fā)展方向。
硅膠色譜填料研究及發(fā)展主要向著兩個(gè)方向進(jìn)行:第l一個(gè)方向是通過控制硅膠基球的形貌、結(jié)構(gòu)、尺寸、材料組成來提高色譜分離性能;第二個(gè)方向是通過表面修飾和改性來制備不同分離模式和不同選擇性的色譜填料以滿足其更廣泛的分離分析的需求。
Van Deemter色譜理論方程式告訴我們色譜柱效和塔板高度由渦流擴(kuò)散系數(shù),分子擴(kuò)散系數(shù)及傳質(zhì)阻力系數(shù)決定。而影響這些參數(shù)的主要是色譜填料形貌結(jié)構(gòu),粒徑大小及分布,孔徑大小。
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