主要設(shè)備編輯***(1) 包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液):Na2CO3 1.59克NaHCO3 2.93克加蒸餾水至1000ml(2) 洗滌緩沖液(PH7.4PBS):0.15MKH2PO4 0.2克Na2HPO4·12H2O 2.9克N*** 8.0克KCl 0.2克Tween-20 0.05% 0.5ml加蒸餾水至1000ml(3) 稀釋液:牛白蛋白(BSA) 0.1克加洗滌緩沖液至100ml或以羊、兔等與洗滌液配成5~10%使用。
哺乳動(dòng)物細(xì)胞溶質(zhì)中的SOD呈綠色,并且由兩種亞單位構(gòu)成,一種含有銅,另一種含有鋅(Cu/Zn-SOD)。線粒體和***SOD為紅紫色并含有錳(Mn-SOD)。E.coli含有Mn-SOD和Fe-SOD。為了測(cè)定SOD的活性,研究人員嘗試了許多間接的或者直接的方法,其中,谷氨酰胺合成酶(GS)測(cè)試盒,NBT的間接法為常用,因?yàn)樗芊奖?。但是,NBT法有幾個(gè)缺點(diǎn),例如生成的染料水溶性差,而且會(huì)和氧化酶的還原型發(fā)生反應(yīng)。雖然cytochrome C法也常被用來做SOD檢測(cè),但它和超氧化物反應(yīng)過于劇烈,不能測(cè)定低水平的SOD。
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